微核與染色體損傷有關(guān)，是染色體或染色單體的無著絲點斷片或紡錘絲受損傷而丟失的整個染色體，在細胞分裂后期在細胞質(zhì)中，末期之后，單獨形成一個或幾個規(guī)則的次核，包含在子細胞的胞質(zhì)內(nèi)，因其比主核小，故稱微核。

    微核試驗優(yōu)點是操作簡便，容易觀察，具有分裂能力的培養(yǎng)細胞均可用于顯示微核。選擇細胞較大，細胞質(zhì)豐富，細胞質(zhì)完整的雙核淋巴細胞，微核游離于細胞質(zhì)中與主核*分開，著色與主核一致或略淺，大小為主核的1／3以下。一般需要計數(shù)2000個細胞。

一、實驗材料

1．受試材料人外周血。

2．RPMll640培養(yǎng)，含20％小牛血清。

3．KCl低滲液 配制75mmol／L KCl水溶液。

4．固定液(甲醇：冰醋酸一3：1)。

5．Glemsa染液。細胞

6．松胞素(Cyt—B)6μg／ml。

二、實驗方法

1．常規(guī)外周血37℃培養(yǎng)96小時，不加秋水仙素。

2．將培養(yǎng)物移人離心管中，1000r／min，離心8min，棄上清液。

3．每管加入75mmol／L KCl溶液3ml，37℃低滲處理3min。

4．每管加入甲醇冰醋酸(3：1)固定液l ml，輕輕打勻預固定。

5．1200r／min，離心8min，棄上清液。

6．每管加上述固定液3 ml，置室溫固定：3min。

7．1000 r/min，離心8min，棄上清液加少許固定液混勻滴片。

8．10％Giernsa染色10min。

三、結(jié)果分析

微核計數(shù)的標準：

1．微核著色深淺與主核相同。

3．位于胞漿內(nèi)。細胞

4．與主核不連接(以區(qū)別主核的突起)。