ELISA有哪些類(lèi)型和原理
ELISA的根底是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶符號(hào)。在測(cè)守時(shí)，受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體外表的抗原或抗體起反響。

此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。再參加酶符號(hào)的抗原或抗體，也經(jīng)過(guò)反響而結(jié)合在固相載體上。結(jié)合在固相載體外表的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶符號(hào)的抗原或抗體既留存其免疫學(xué)活性，又留存酶的活性。

參加酶反響的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)品，產(chǎn)品的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。因?yàn)槊傅拇呋屎芨?，間接地?cái)U(kuò)大了免疫反響的結(jié)果，使測(cè)定辦法達(dá)到很高的敏感度。

雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原zui常用的辦法，操作步驟如下：
1) 將特異性抗體與固相載體聯(lián)合，構(gòu)成固相抗體。洗刷除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
2) 加受檢標(biāo)本，保溫反響。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合，構(gòu)成固相抗原抗體復(fù)合物。洗刷除去其他未結(jié)合物質(zhì)。
3) 加酶標(biāo)抗體，保溫反響。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗刷未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。
4) 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)品。經(jīng)過(guò)比色，測(cè)知標(biāo)本中抗原的量。
在臨床檢修中，此法合用于檢修各種蛋白質(zhì)等大分子抗原，例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要獲得針對(duì)受檢抗原的異性抗體，就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而樹(shù)立此法。這種雙位點(diǎn)夾心法具有很高的特異性，而且能夠?qū)⑹軝z標(biāo)本和酶標(biāo)抗體一起保溫反響，作一步法檢測(cè)。如使用單克隆抗體，一般挑選兩個(gè)針對(duì)抗原上不同決定簇的單抗，別離用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物