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人ELISA檢測試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中抗BP180抗體(BP180-Ab)的含量。如血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。今天,我們首要講解人ELISA檢測試劑盒的正確操作步驟:
1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2、待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加*40μL。
3、設(shè)置規(guī)范品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;規(guī)范品孔各加不同濃度的規(guī)范品50μL。
4、隨后規(guī)范品孔和樣本孔中(空白孔不加)參加辣根過氧化物酶(HRP)符號的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5、一切孔參加底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
6、一切孔參加終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波利益測定各孔的OD值。
7,棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
注意事項:人ELISA檢測試劑盒在2-8℃,使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用;實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)
保存;濃度為0的S0號規(guī)范品即可視為陰性對照或者空白;依照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍,zui終成果乘以5才是樣本實際濃度;嚴格依照說明書中標明的時間、加液量及次序進行溫育操作。一切液體組分使用前充分搖勻。
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