ELISA試劑盒DAB顯色時(shí)刻過(guò)長(zhǎng)或濃度過(guò)高，顯色時(shí)刻不超越5-12分鐘會(huì)導(dǎo)致染色過(guò)強(qiáng)，孵育的溫度一般在室溫20-28度，抗體濃度過(guò)高或孵育時(shí)刻過(guò)長(zhǎng)都會(huì)下降抗體滴度，操作中增加試劑時(shí)緩沖液未瀝干應(yīng)該每步滴加試劑前瀝干切片中剩余的緩沖液，這樣可以防止染色變?nèi)?，試劑超越有用使用時(shí)刻應(yīng)替換試劑，每步?jīng)_刷3次每次5分鐘。
 
選擇ELISA試劑盒應(yīng)盡量選擇正規(guī)廠家，產(chǎn)品經(jīng)相應(yīng)部門審閱認(rèn)可，試劑應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡(jiǎn)便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面點(diǎn)評(píng)。
靈敏度：有二層意義，
1. 為試劑檢出被檢物質(zhì)的低量的才能
2. 為試劑對(duì)很多樣品中陽(yáng)性檢出的才能
特異性：常用穿插反響率表明。含有與待測(cè)物附近結(jié)構(gòu)部份的物質(zhì)可能存在穿插反響，使測(cè)定成果升高，可能導(dǎo)致假陽(yáng)性，所以穿插反響是點(diǎn)評(píng)其質(zhì)量的要害目標(biāo)。
精密度：ELISA試劑盒一般指其批內(nèi)CV%，其值應(yīng)小于15%；定量試劑應(yīng)一起調(diào)查線性規(guī)模。
準(zhǔn)確度：經(jīng)過(guò)增加回收實(shí)驗(yàn)進(jìn)行點(diǎn)評(píng)。
簡(jiǎn)便性：指在不影響試劑的前三項(xiàng)目標(biāo)的前題下，實(shí)驗(yàn)和測(cè)定過(guò)程越少越好，在定性實(shí)驗(yàn)中成果判斷簡(jiǎn)單明了，定量實(shí)驗(yàn)成果核算也應(yīng)簡(jiǎn)單。
安全性：指試劑對(duì)操作者和環(huán)境安全無(wú)害無(wú)傳染性。
經(jīng)濟(jì)性：試劑在平等質(zhì)量條件下經(jīng)過(guò)大規(guī)模出產(chǎn)或技術(shù)進(jìn)步下降成本，而市場(chǎng)價(jià)格比較合理。
試劑點(diǎn)評(píng)：需求有威望的確證辦法和確證的樣品進(jìn)行檢測(cè)。