ELISA屬固相免疫測(cè)定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)作。以抗體包被的夾心法為例，參加板孔中的標(biāo)本，其間的抗原并不是都有平等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì)，只需*靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體觸摸。這是一個(gè)逐步平衡的進(jìn)程，因而需經(jīng)分散才干到達(dá)反響的結(jié)尾。在這以后參加的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也相同如此。這就是為什么ELISA反響總是需求必定時(shí)刻的溫育。

elisa試劑盒溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫文4℃（冰箱溫度）等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA辦法作反響動(dòng)力學(xué)研究時(shí)，實(shí)驗(yàn)標(biāo)明，兩次抗原抗體反響一般在37℃經(jīng)1-2小時(shí)，產(chǎn)品的生成可達(dá)高峰。為加快反響，可提高反響的溫度，有些實(shí)驗(yàn)在43℃進(jìn)行，但不宜選用更高的溫度。抗原抗體反響4℃更為*，在放射免疫測(cè)定中多使反響在冰箱中夜，以形成*多的沉積。但因所需時(shí)刻太長(zhǎng)，在ELISA中一般不予選用。
保溫的辦法除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，一般均選用水浴，可將ELISA板置于水浴箱中，ELISA板底應(yīng)貼著水面，使溫度敏捷平衡。為防止蒸騰，板上應(yīng)加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此刻可讓反響板漂浮在水面上。若用保溫箱，ELISA板應(yīng)放在濕盒內(nèi)，濕盒要選用傳熱性杰出的材料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，*后將ELISA板放在濕紗布上。

濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)則的溫度，特別是在氣溫較低的時(shí)候更應(yīng)如此。無(wú)論是水浴仍是濕盒溫育，反響板均不宜疊放，以保證各板的溫度都能敏捷平衡。室溫溫育的反響，操作時(shí)的室溫應(yīng)嚴(yán)厲約束在規(guī)則的范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)室溫溫度是指20-25℃，但具體操作時(shí)可根據(jù)說(shuō)明書(shū)的要求操控溫育。室溫溫育時(shí)，ELISA板只需平置于操作臺(tái)上即可。ELISA試劑盒應(yīng)留意溫育的溫度和時(shí)刻應(yīng)按規(guī)則力求準(zhǔn)確。為保證這一點(diǎn)，一個(gè)人操作時(shí)，一次不宜多于兩塊板一起測(cè)定。

怎么辦理ELISA試劑盒的質(zhì)量操控問(wèn)題。
1、斷定操控的目標(biāo)；
2、規(guī)則操控目標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)（預(yù)期值）；
3、擬定或選擇操控辦法和手法；
4、丈量實(shí)踐數(shù)據(jù)；
5、比較或較對(duì)實(shí)踐數(shù)據(jù)與預(yù)期值之間的差異，并說(shuō)明產(chǎn)生這一差異的原因。超出預(yù)訂差錯(cuò)范圍，報(bào)警系宣布信號(hào)，反應(yīng)通道中止。
6、采納舉動(dòng)，解決差異?；謴?fù)原狀（原標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)）的手法發(fā)揮作用。