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上海酶聯(lián)生物研究所

ELISA試劑盒歩驟分析

時間:2018-2-24閱讀:280
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其根本辦法是將已知的抗原或許抗體吸附在固相載體外表,并堅持其免疫活性。然后抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保存其免疫活性,elisa試劑盒又保存酶的活性。在測守時,把受檢標(biāo)本(測定其間的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同與固相載體外表的抗原或抗體起反響。用洗刷的辦法使固相載體上構(gòu)成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開,zui終結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成必定的比例。參加酶反響的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)品,產(chǎn)品的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)色彩反響的深淺刊物定性或定量分析。

 

大家看到此進程中有一個“固相載體”,那就是酶標(biāo)板。酶標(biāo)板是一種配合在酶標(biāo)儀上,用來做酶聯(lián)免疫試驗的耗材。盡管它看上去只是一塊普通的有孔的塑料板,elisa試劑盒但是在酶免疫測定中卻是一個不行短少的部分。所以能夠知道,酶標(biāo)板是一個不行短少的中介,沒有了這個中介,整個試驗就無法進行操作。換一句話說,只需你用酶標(biāo)儀做酶聯(lián)免疫試驗,就必然會用到酶標(biāo)板?;虿灰椎玫綕M足的純化抗原時,可用此法檢測特異性抗體。其原理為標(biāo)本中的抗體和必定量的酶標(biāo)抗體競賽與固相抗原結(jié)合。標(biāo)本中抗體量越多,結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗體愈少,因而陽性反響呈色淺于陰性反響。

 

如抗原為高純度的,可直接包被固相。如抗原中會有攪擾物質(zhì),直接包被不易成功,可選用捕獲包被法,即先包被與固相抗原相應(yīng)的抗體,然后參加抗原,構(gòu)成固相抗原。洗刷除掉抗原中的雜質(zhì),然后再加標(biāo)本和酶標(biāo)抗體進行競賽結(jié)合反響。競賽法測抗體有多種形式,可將標(biāo)本和酶標(biāo)抗體與固相抗原競賽結(jié)合,抗hbelisa試劑盒一般選用此法。另一種形式為將標(biāo)本與抗原一同參加到固相抗體中進行競賽結(jié)合,洗刷后再參加酶標(biāo)抗體,與結(jié)合在固相上的抗原反響??筯be的檢測一般選用此法。

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