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當(dāng)前位置:上海酶聯(lián)生物研究所>>技術(shù)文章>>科研試劑盒所需要樣本應(yīng)該這樣做
ELISA試劑盒樣本前處理是酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)中要害的一步,稍有不小心將致使實(shí)驗(yàn)滿盤皆輸,怎么安全,方便的處理樣本,為協(xié)助我們了解ELISA試劑盒所需求樣本處理及請(qǐng)求,我司做出了以下的剖析:
1. 血清:室溫血液天然凝結(jié)10-20分鐘,離心20分鐘擺布(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清,保留過程中如呈現(xiàn)沉積,應(yīng)再次離心。操作過程中避免任何細(xì)胞影響。運(yùn)用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的請(qǐng)求挑選EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘擺布 (2000-3000轉(zhuǎn)/分)去掉顆粒。細(xì)心搜集上清,保留過程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管搜集,離心20分鐘擺布(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清,保留過程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢查排泄性的成份時(shí),用無(wú)菌管搜集。離心20分鐘擺布(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。檢查細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml擺布。經(jīng)過重復(fù)凍融,以使細(xì)胞損壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘擺布(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清 。保留過程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
5. 安排標(biāo)本:切開標(biāo)本后,稱取分量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保留備用。標(biāo)本消融后依然堅(jiān)持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),ELISA試劑盒用手藝或勻漿器將標(biāo)本勻漿充沛。離心20分鐘擺布(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。分裝后一份待檢查,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本收集后盡早進(jìn)行獲取,獲取按有關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,獲取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能立刻進(jìn)行實(shí)驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保留,但應(yīng)避免重復(fù)凍融.
7. 不能檢查含NaN3的樣品,因NaN3按捺辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
ELISA試劑盒技能的操作關(guān)鍵
優(yōu)異的試劑,杰出的儀器和的操作是確保ELISA檢測(cè)成果牢靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的構(gòu)成不同而有所區(qū)別,國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)查驗(yàn)通常均用板式點(diǎn).本文將敘說板式注意關(guān)鍵,要具體的運(yùn)用說明,嚴(yán)格遵循規(guī)則操作,必能得出的成果.
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