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當(dāng)前位置:酶聯(lián)(上海)生物試劑科技有限公司>>公司動(dòng)態(tài)>>ELISA檢測(cè)試劑盒的操縱步驟
因此,雙波長(zhǎng)比色測(cè)定具有能排除由微滴板本身、板孔內(nèi)標(biāo)本的非特異吸收、指紋、刮痕、灰塵等對(duì)特異顯色測(cè)定吸光度的影響的長(zhǎng)處。比色結(jié)果的表達(dá)以往通用光密度(oplical density,OD),現(xiàn)按劃定用吸光度(absorbence,A),兩者含義相同。ELISA檢測(cè)試劑盒所謂的單波長(zhǎng)比色等于通常的以對(duì)顯色具有zui大吸收的波長(zhǎng)如450nm或492nm進(jìn)行比色測(cè)定;而雙波長(zhǎng)雙色則酶標(biāo)儀在敏感波長(zhǎng)如450nm和非敏感波長(zhǎng)630nm下各測(cè)定一次,敏感波上下的吸光度測(cè)定值為樣本測(cè)定酶反應(yīng)特異顯色的吸光度與板孔上指紋、刮痕、灰塵等臟物所致的吸光度之和;非敏感波長(zhǎng)下測(cè)定即改變波長(zhǎng)至一定值,使得樣本測(cè)定酶反應(yīng)特異顯色的吸光度值為零,此時(shí)測(cè)得的吸光度即為臟物的吸光度值。
以TMB為底物和以O(shè)PD為底物的試劑盒均有使用,ELISA檢測(cè)試劑盒而前者比色波長(zhǎng)為450nm,后者為492nm,濾光片需根據(jù)要求隨時(shí)更換。zui后酶標(biāo)儀給出的數(shù)值為敏感波長(zhǎng)下的吸光度值與非常感波長(zhǎng)下的吸光度值的差。以軟板為載體的試驗(yàn),需先將板置于尺度96孔的座架中,才可進(jìn)行比色。
超過一周測(cè)定的需低溫冰存。如在冰箱中保留過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA 中可使本底加深。保留血清自采集時(shí)就應(yīng)留意無菌操縱,也可加入適當(dāng)防腐劑。除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)檢修中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。本文將敘述板式ELISA各個(gè)的留意要點(diǎn),珠式、管式及磁性球ELISA,ELISA檢測(cè)試劑盒價(jià)格均與特殊儀器配合應(yīng)用,兩者均有具體的使用說明,嚴(yán)格遵照劃定操縱,必能得出正確的結(jié)果。
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