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技術(shù)文章

Masson 三色染色液

閱讀:811發(fā)布時(shí)間:2016-8-6

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

結(jié)締組織狹義上是指其含有的三種纖維:膠原纖維、網(wǎng)狀纖維、彈力纖維,而膠原纖維

(collagen fiber)是分布zui廣、含量zui多的一種纖維。Masson 三色染色又稱馬松染色,是

結(jié)締組織染色中zui經(jīng)典的一種方法,是膠原纖維染色而經(jīng)典的技術(shù)方法。所謂三色染色

通常是指染胞核和能選擇性的顯示膠原纖維和肌纖維。該法染色原理不陰離子染料分子的大

小和組織的滲透有關(guān):分子的大小由分子量來體現(xiàn),小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的

組織;而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高的組織。然而,淡綠或苯胺藍(lán)的分子量

都很大,因此 Masson 染色后肌纖維呈紅色,膠原纖維呈綠色(淡綠)或藍(lán)色(苯胺藍(lán)),主要

用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。

三色染色的特點(diǎn):①染色穩(wěn)定;②分化時(shí)間短,12s;③色彩清晰

鮮艷;④適用范圍廣,適宜于組織的石蠟切片、冰凍切片等染色;⑤所染切片保存時(shí)間長(zhǎng)且

丌易褪色。

 

 

產(chǎn)品組成:

 

 

 

 

名稱

編號(hào)

DC0032

50ml

DC0032

100ml  Storage

 

 

 

試劑(A) :Weigert

鐵*

A1:Weigert 染液 A   25ml    50ml   RT 避光

A2: Weigert 染液 B   25ml    50ml   RT

 

 

 

臨用前,取 A1、 A2 等量混合即為 Weigert 鐵*,丌宜提前配制。

試劑(B): 酸性乙醇分化液 50ml 100ml RT

試劑(C): Masson 藍(lán)化液 50ml 100ml RT

試劑(D): 麗春紅品紅染色液 50ml 100ml RT 避光

試劑(E): 弱酸溶液 50ml 100ml RT

試劑(F): 磷鉬酸溶液 50ml 100ml RT 避光

試劑(G): 苯胺藍(lán)染色液 50ml 100ml RT 避光

使用說明書 1 

 

 

自備材料:

1、固定液:選用甲醛鹽溶液

2、系列乙醇

3、蒸餾水

 

 

 

 

 

操作步驟(僅供參考)

1、切片常規(guī)脫蠟至水,用配制好的 Weigert 鐵蘇木素染色 510min。

2、用酸性乙醇分化液分化,水洗。

3、用 Masson 藍(lán)化液返藍(lán),水洗。

4、蒸餾水洗 1min。

5、麗春紅品紅染色液染色 510min。

6、在上述操作過程中按蒸餾水:弱酸溶液=2:1 比例配制弱酸工作液,用弱酸工作液洗 1min。

7、磷鉬酸溶液洗 12min。

8、用配制好的弱酸工作液洗 1min。

9、直接入苯胺藍(lán)染色液中染色 12min。

10、用配制好的弱酸工作液洗 1min。

11、95%乙醇快速脫水。無水乙醇脫水 3 次,每次 510s。

12、二甲苯透明 3 次,每次 12min。中性樹膠封固。

 

 

 

 

細(xì)胞核,膠原纖維/蛋白

藍(lán)色

胞漿、肌肉、紅細(xì)胞

紅色

 

 

 

 

 

注意事項(xiàng):

1、 切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。固定起著重要的作用,使用丌同的固定液可延或縮短染色時(shí)間。

2、  A1、A2 等量混合即為 Weigert 鐵蘇木素染液,一般 24h 失去染色力。

3、 酸性乙醇分化時(shí)間應(yīng)根據(jù)切片厚薄、組織的類別和新舊而定。

4、 弱酸溶液可使色彩更清晰鮮艷,如使用量大可自行配制 0.10.3%乙酸溶液予以替代。

5、 磷鉬酸分化時(shí)要在鏡下控制,分化到膠原纖維呈淡紅色、纖維呈紅色即可。分化時(shí)間根

據(jù)染色深淺而定,一般 12min。

6、 Masson 藍(lán)化液亦可自行配制 Scott 促藍(lán)液或 0.11%*水溶液予以替代。

 

 

有效期:12 個(gè)月有效。


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