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上海研晶生物技術有限公司
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閱讀:281發(fā)布時間:2015-3-26
elisa實驗避免加樣出錯的小竅門
大家在做ELISA酶聯免疫試劑盒的時候是不是經常會出現樣品加錯或重復添加的情況呢?那么怎樣能zui大限度的避免這種情況的發(fā)生呢,下面上海研晶的實驗經歷分享給大家來解決這個問題。
ELISA是免疫學中常用檢測方法,加樣時淡黃色的血清能明顯的區(qū)分哪個孔加了哪個孔沒加。但是有一些項目,需要稀釋血清(例如在做乙肝病毒核心抗體時是要稀釋血清30倍),稀釋后淡黃色的血清近乎無色,加樣時非常容易搞錯,很難區(qū)分哪個孔加過哪個孔沒加過。在ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結合物,加底物。凍結血清融解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上強烈振蕩。ELISA試劑盒制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只要待血清天然凝固、血塊收縮后即可取得。也可在板孔中加入稀釋液,再在其加入血清標本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。
下面舉幾個小竅門,來避免加樣出錯:
1.用一張寫滿字的紙,字越多越好,比如報紙,墊在下面,這樣,加過標本的小孔看過去下面的字會變小,沒加的字正常,非常容易區(qū)分。
2.可以利用液面反光與沒有加的孔加以區(qū)別。
3.在標本加完后,再把加樣槍全壓下,使液面產生小氣泡,也可以加以區(qū)分。
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