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更新時(shí)間:2015-04-20 16:15:16瀏覽次數(shù):86次
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人髓樣甲狀腺腫瘤細(xì)胞,TT進(jìn)口細(xì)胞基本特性
形態(tài)特性:上皮樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性:人髓樣甲狀腺腫瘤細(xì)胞,TT細(xì)胞. 細(xì)胞由Leong
SS等,自一位77歲白人女性甲狀腺髓樣癌患者的穿刺活檢樣本中建立。TT細(xì)胞持續(xù)產(chǎn)生高水平的降血鈣素和CEA。更換培養(yǎng)基后24h和72h,在培養(yǎng)基中檢測(cè)到的免疫活性的降血鈣素濃度分別為3900
pg/106個(gè)細(xì)胞和7700 pg/106個(gè)細(xì)胞。 72小時(shí)后CEA積累濃度超過(guò)27
ng/106個(gè)細(xì)胞;該細(xì)胞zui初是在RPMI1640培養(yǎng)液中培養(yǎng),可產(chǎn)生神經(jīng)肽,但還不知道在F12培養(yǎng)液中培養(yǎng)是否會(huì)產(chǎn)生。
培養(yǎng)條件:F12K 10%FBS
傳代方法:1:3~1:4傳代,每周換液2次。
傳代情況:C5
凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè):培養(yǎng)法(-)
STR:
Amelogenin:X;CSF1PO:10,13;D13S317:11;D16S539:12,13;D18S51:12;D19S433:14,15;D21S11:29,32.2;D2S1338:17,23;D3S1358:15;D5S818:12,13;D7S820:10,12;D8S1179:15,16;FGA:21,25;TH01:6,9;TPOX:8,11;vWA:16,18;
染色體:20~44;65~79
使用權(quán)限:A類
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客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞,用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)離心收集細(xì)胞,接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進(jìn)口胎牛血清. 剛接到細(xì)胞,若細(xì)胞不多時(shí) 血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
操作臺(tái)的滅菌處理:
1)無(wú)菌室及無(wú)菌操作臺(tái)(laminarflow)用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,70%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面,并開(kāi)啟無(wú)菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘。
2)細(xì)胞用的培養(yǎng)基如有相同切記不可共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。 (注:實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在抬面之*無(wú)菌區(qū)域,勿在邊緣之非無(wú)菌區(qū)域操作。)
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(shí)(或者24-48小時(shí))后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞情況而定。
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