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上海博研生物工程研究中心
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更新時間：2015-04-20 14:50:49瀏覽次數：88次
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人乳腺導管瘤細胞,BT-474進口細胞基本特性
形態(tài)特性：上皮樣；圓形、成團
生長特性：貼壁生長
特征特性：人乳腺導管瘤細胞,BT-474細胞.該細胞系由Lasfargues E和 Coutinho
WG建立，源于一名60歲患有浸潤性乳腺導管癌的白人女性的實體瘤。
培養(yǎng)條件：RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；0.01mg/ml Insulin
傳代方法：1:2~1:3傳代；2~3天換液1次。
傳代情況：C6
凍存條件：基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測：培養(yǎng)法（-）
STR：Amelogenin：X；CSF1PO：10，11；D13S317：11；D16S539：9，11；D18S51：13，18；D19S433：14，17；D21S11：28，32.2；D2S1338：19；D3S1358：17；D5S818：11，13；D7S820：9，12；D8S1179：10，12；FGA：22，25；TH01：7；TPOX：8；vWA：15，16；
染色體：90~100
使用權限：A類
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客戶收到細胞后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進口胎牛血清. 剛接到細胞，若細胞不多時 血清濃度可以加到15％去培養(yǎng)。若細胞迏到80%左右 ，血清濃度還是在10％。
操作臺的滅菌處理：
1)無菌室及無菌操作臺(laminarflow)用紫外燈照射30-60分鐘滅菌，70%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘。
2)細胞用的培養(yǎng)基如有相同切記不可共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細胞間污染。 (注：實驗操作應在抬面之*無菌區(qū)域，勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。)
培養(yǎng)細胞將復合細胞計數要求的細胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內，將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內2-4小時(或者24-48小時)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng)，換液的時間由細胞情況而定。
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