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上海博研生物工程研究中心
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更新時(shí)間:2015-04-18 13:54:58瀏覽次數(shù):72次
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人紅系白血病細(xì)胞,TF-1進(jìn)口細(xì)胞基本特性
細(xì)胞數(shù)量:100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞數(shù)
細(xì)胞檢測(cè):細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
細(xì)胞運(yùn)輸:干冰運(yùn)輸(1 Vial)或活細(xì)胞運(yùn)輸(T-25 flasks)
細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)
特征特性:人紅系白血病細(xì)胞,TF-1細(xì)胞.該細(xì)胞系1987年由Kitamura
T等建立,源于一名35歲日本男性的肝素化骨髓抽取樣本,該患者具有嚴(yán)重的全血細(xì)胞減少癥。細(xì)胞生長(zhǎng)*依賴(lài)于IL-3或GM-CSF,對(duì)IL-5無(wú)反應(yīng)。多種淋巴因子和細(xì)胞因子對(duì)該細(xì)胞都有作用,如:IL-1、IL-4、IL-6、IL-9、IL-11、IL-13、CSF、LIF、NGF。該細(xì)胞不表達(dá)血型糖蛋白A和碳酸酐酶I。由該細(xì)胞的形態(tài)和細(xì)胞化學(xué)特征及珠蛋白基因的組成性表達(dá),顯示該細(xì)胞屬于紅系。
培養(yǎng)條件: RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;4mM glutamine
傳代方法:維持細(xì)胞濃度在3×104~5×105 cells/ml;2~3天換液1次。
傳代情況:C6
凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè):培養(yǎng)法(-)
STR:
Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12,13;D13S317:8,9;D16S539:9,12;D18S51:13;D19S433:14,16;D21S11:30;D2S1338:19;D3S1358:15;D5S818:13;D7S820:12;D8S1179:11,15;FGA:18,19;TH01:7,9;TPOX:8;vWA:15,17;
染色體:78~104
使用權(quán)限:A類(lèi)
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客戶(hù)收到細(xì)胞后,請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞,用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)離心收集細(xì)胞,接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進(jìn)口胎牛血清. 剛接到細(xì)胞,若細(xì)胞不多時(shí) 血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
操作臺(tái)的滅菌處理:
1)無(wú)菌室及無(wú)菌操作臺(tái)(laminarflow)用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,70%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面,并開(kāi)啟無(wú)菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘。
2)細(xì)胞用的培養(yǎng)基如有相同切記不可共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。 (注:實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在抬面之*無(wú)菌區(qū)域,勿在邊緣之非無(wú)菌區(qū)域操作。)
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(shí)(或者24-48小時(shí))后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞情況而定。
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