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色譜的基礎(chǔ)入門知識(shí)你了解嗎?

閱讀:804發(fā)布時(shí)間:2018-1-2

一、色譜的起源

    色譜法起源于20世紀(jì)初,1906年俄guo科學(xué)家米哈伊爾·茨維特用碳酸鈣填充豎立的玻璃管,以石油醚洗脫植物色素的提取液,經(jīng)過一段時(shí)間洗脫之后,植物色素在碳酸鈣柱中實(shí)現(xiàn)分離,由一條色帶分散為數(shù)條平行的色帶。由于這一實(shí)驗(yàn)將混合的植物色素分離為不同的色帶,因此茨維特將這種方法命名為Хроматография,這個(gè)單詞zui終被英語等拼音語言接受,成為色譜法的名稱。漢語中的色譜也是對(duì)這個(gè)單詞的意譯。   

    茨維特并非科學(xué)家,他對(duì)色譜的研究以俄語發(fā)表在俄guo的學(xué)術(shù)雜志之后不久,*次世界大戰(zhàn)爆發(fā),歐洲正常的學(xué)術(shù)交流被迫終止。這些因素使得色譜法問世后十余年間不為學(xué)術(shù)界所知,直到1931年德國柏林威廉皇帝研究所的庫恩將茨維特的方法應(yīng)用于葉紅素和葉黃素的研究,庫恩的研究獲得了廣泛的承認(rèn),也讓科學(xué)界接受了色譜法,此后的一段時(shí)間內(nèi),以氧化鋁為固定相的色譜法在有色物質(zhì)的分離中取得了廣泛的應(yīng)用,這就是今天的吸附色譜

1.色譜法的發(fā)展歷史表

1906

Tswett

用碳酸鈣作吸附劑分離植物色素。zui先提出色譜概念

1931

Kuhn,Lederer 

用氧化鋁和碳酸鈣分離α-、β和γ-胡蘿卜素,使色譜法開始為人們所重視

1938

Lzmailov,Shraiber

zui先使用薄層色譜法

1938

Taylor,Uray

用離子交換色譜法分離鋰和鉀的同位素

1941

Martin,Synge

提出色譜塔板理論;發(fā)明液-液分配色譜;語言了氣體可作為流動(dòng)相(即氣象色譜)

1944

Consden等

發(fā)明了紙色譜

1949

Macllean

在氧化鋁中加入淀粉黏合劑制作薄層板,使薄層色譜進(jìn)入實(shí)用階段

1952

Martin,James

從理論和實(shí)踐方面完善了氣-液分配色譜法

1956

Van Demmter等

提出色譜速率理論,并應(yīng)用于氣相色譜

1957

Stein和Morre

發(fā)明基于離子交換色譜的氨基酸分析儀器

1958

Golay

發(fā)明毛細(xì)管柱氣相色譜

1959

Porath,F(xiàn)lodin

發(fā)表凝膠過濾色譜的報(bào)告

1964

Moore

發(fā)明凝膠滲透色譜

1965

Giddings

發(fā)展了色譜理論,為色譜學(xué)的發(fā)展奠定了理論基礎(chǔ)

1975

Small

發(fā)明了以離子交換劑為固定相、強(qiáng)電解質(zhì)為流動(dòng)相,采用抑制性電導(dǎo)檢測(cè)的新型離子色譜法

1981

orgenson等

創(chuàng)立了毛細(xì)管電脈法

              

二、色譜定義

1.色譜法:利用組分在兩相間分配系數(shù)不同而進(jìn)行分離的技術(shù)

2.流動(dòng)相:攜帶樣品流過整個(gè)系統(tǒng)的流體

3.固定相:靜止不動(dòng)的一相,色譜柱

3.色譜是一種分離技術(shù).

4.色譜的主要目的是對(duì)混合物中的目標(biāo)物分離和定量

 

三、色譜分類

1、液相色譜 High Performance Liquid Chromatography (HPLC)

2、氣相色譜 Gas Chromatography (GC)

3、薄層色譜 Thin-Layer Chromatography (TLC)

4、毛細(xì)管電泳 Capillary Electrophoresis(CE)

 

四、色譜原理

    利用樣品混合物中各組分理、化性質(zhì)的差異,各組分程度不同的分配到互不相溶的兩相中。當(dāng)兩相相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),各組分在兩相中反復(fù)多次重新分配,結(jié)果使混合物得到分離。

 

五、色譜優(yōu)缺點(diǎn)

1、同時(shí)分析

2、分離性能好

3、靈敏度高 (ppm-ppb)

4、進(jìn)樣量小 (1-100uL)

HPLC vs GC

液相色譜:以液體作為流動(dòng)相的色譜分離方法。

1、適用于高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性和熱穩(wěn)定性差的化合物的分析。

2、流動(dòng)相具有運(yùn)載樣品分子和選擇性分離的雙重作用。

氣相色譜:以氣體作為流動(dòng)相的色譜分離方法。

1、適用于沸點(diǎn)較低、熱穩(wěn)定性好的中小分子化合物的分析。

2、流動(dòng)相只起運(yùn)載樣品分子的能力。

 

六、色譜的應(yīng)用

經(jīng)過多年的發(fā)展,離子色譜已經(jīng)在生產(chǎn)生活的各種領(lǐng)域發(fā)揮著重要的作用。

1.環(huán)境分析

    離子色譜在其產(chǎn)生初期zui重要的應(yīng)用便是環(huán)境樣品的分析,其應(yīng)用對(duì)象主要是環(huán)境樣品中各種陰、陽離子的定性、定量分析。
    作為一種快速準(zhǔn)確而有效果分析方法,離子色譜廣泛應(yīng)用于微電子、電力工業(yè)中高純水、高純?cè)噭┖哿侩s質(zhì)的分析。

2.食品分析

    與傳統(tǒng)的分析方法相比,離子色譜法的突出優(yōu)點(diǎn)是多組分同時(shí)進(jìn)行分析,樣品處理簡(jiǎn)單,因此成為食品和飲料中陰陽離子、有機(jī)酸、胺和糖類分析的較好方法。

3.聯(lián)用技術(shù)

    離子色譜聯(lián)用技術(shù)是離子色譜發(fā)展的一個(gè)方向。聯(lián)用技術(shù)的發(fā)展,使得離子色譜分析技術(shù)的應(yīng)用范圍和檢測(cè)靈敏度有了很大的提高,關(guān)于離子色譜--原子吸收(發(fā)射)光譜、離子色譜--電感耦合等離子體、離子色--質(zhì)譜的聯(lián)用已有不少報(bào)道。

 

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