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南京科捷檢測科技發(fā)展有限公司
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閱讀：2566發(fā)布時間：2017-6-21
有機酸(如蘋果酸、檸檬酸、酒石酸、乳酸、富馬酸等)是果汁中主要的風味營養(yǎng)物質(zhì)。果汁中的有機酸可以促進消化腺活動，有助于食物的吸收，改善患者的食欲。天然果汁營養(yǎng)豐富，深受消費者青睞。果汁中有機酸的含量的高低與果汁產(chǎn)品的品質(zhì)有密切關系，同時也受生產(chǎn)技術和加工工藝的影響。乳酸是評價果汁產(chǎn)品質(zhì)量的一項重要指標。在乳酸菌的作用下，果汁中的碳水化合物發(fā)酵生成乳酸，同時在合成蘋果酸的過程中也會產(chǎn)生富馬酸，因此，若蘋果汁中含有富馬酸，就有可能添加了合成蘋果酸。然而，在不添加合成蘋果酸的情況下，過度的加工條件也能產(chǎn)生富馬酸，這是因為在果汁濃縮過程中，蘋果酸受熱會生成富馬酸，因此，相同條件下生產(chǎn)的鮮榨蘋果汁比濃縮蘋果汁含有較少的富馬酸。如果蘋果汁中檸檬酸的含量超出一定的值，對蘋果汁而言，可能加入了檸檬酸或其他果汁。
實驗利用固相萃取-反相液相色譜法，對果汁中11種有機酸的進行檢測。
儀器設備：
LC-600B等度液相色譜儀（配四元泵、二極管陣列檢測器、自動進樣器及色譜數(shù)據(jù)工作站）
LC-600B智能全控液相色譜系統(tǒng)由1臺P600B高壓恒流泵、1臺UV600B紫外檢測器與1臺SCL600B系統(tǒng)控制器直接構成梯度分析系統(tǒng)。*采用柱塞浮動式安裝方式，增強儀器性能的穩(wěn)定性和使用的持久性。廣泛應用于研究開發(fā)、醫(yī)藥檢驗、食品檢測、化工分析、監(jiān)測等眾多分析領域。
依照“層層保護，逐級過濾”的設計理念，水質(zhì)電阻率可達到18.25ΜΩ·cm（25℃），適用于各種標準實驗、痕量分析、原子吸收、熒光分析、生化分析、環(huán)境分析、血清檢查、氣相色譜以及液相等用水。廣泛應用于材料科學、生命科學、空間技術等領域中以及食品、藥品、自然環(huán)境中微量元素和重金屬元素檢測實驗。
樣品的提取與進化
稱取濃縮果汁樣品5.00g(至0.01g)，將pH調(diào)至8~10，加水定容至20mL，渦旋振蕩溶解，使其混合均勻，以待下一步的凈化處理。分別用5mL甲醇、5mL水預處理固相萃取小柱后，將稀釋的果汁過柱富集，控制流速在1.0~1.5mL/min范圍，依次用3mL5%氨水、3mL甲醇淋洗固相萃取小柱，棄去全部流出液，氮氣吹干10min，用5mL5%甲酸甲醇洗脫，收集洗脫液，于40℃水浴中氮氣吹干，zui后用流動相定容至1.00mL，過0.45μm微孔濾膜，取濾液用于U－PLC-MS/MS分析。
色譜條件
色譜柱 | Aichrom BondAQ C18(25mm×4.6mm，5μL) |
固相萃取柱 | Oasis MAX |
流動相 | 包括(A)0.02mol/L NH4H2PO4溶液(用H3PO4調(diào)pH至2.8)、(B)水，采用等度洗脫(體積比為99:1) |
流速 | 0.8mL/mim |
柱溫 | 35℃ |
檢測波長 | 210nm |
進樣量 | 10μL |
色譜圖分析
a.酒石酸； b.奎寧酸; c.蘋果酸；d.莽草酸；e.Vc；f.乙酸;
g.馬來酸；h.乳酸；i.琥珀酸；j.富馬酸；k.檸檬酸。
A.有機酸的混合標準溶液；B.蘋果汁;C.梨汁；D.石榴汁；E. 草莓汁
對照品和濃縮果汁樣品色譜圖
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