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ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。
elisa試劑盒抗體一般不能用于免疫組化的,雖然說理論上這兩個都是屬于免疫反應(yīng)實驗,但是實際操作上還是有區(qū)別的。
首先,ELISA的抗體一般是針對抗原蛋白的三極結(jié)構(gòu)的,所以操作一般在室溫下進(jìn)行,避免高溫。
而免疫組織化學(xué)的抗體是針對抗原的一級結(jié)構(gòu)的,所以要進(jìn)行抗原熱修復(fù)。如果相互混用,很可能不能出結(jié)果。
抗體的標(biāo)記并不一樣,ELISA的抗體一般是Streptavidin-HRP標(biāo)記,免疫組織化學(xué)的抗原抗體結(jié)合后,還須SP、SABC將顯色反應(yīng)放大,才能在顯微鏡下觀察。
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