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培養(yǎng)基是供微生物、植物組織和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。有的培養(yǎng)基還含有抗菌素和色素,用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定。
培養(yǎng)基配制過程中應(yīng)注意事項:
1.分裝時注意不要使培養(yǎng)基沾染在管口或瓶口,以免浸濕棉塞, 引起污染。
2.pH不要調(diào)過頭,以避免回調(diào)而影響培養(yǎng)基內(nèi)各離子的濃度。
3.需不斷攪拌,以防瓊脂糊底燒焦。
4.嚴(yán)格按照培養(yǎng)基配方配制。
培養(yǎng)基在使用前通過高壓或過濾滅菌。防止污染應(yīng)該注意以下事項:
確認工作細胞庫是否被污染,確認毒種工作種子批是否被污染,確認所用培養(yǎng)基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細菌、真菌及支原體無菌試驗來確認并排除。同時要對無菌試驗培養(yǎng)基的靈敏度進行驗證。實際生產(chǎn)中,可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),48小時即可觀察有無污染。
其它:高壓滅菌設(shè)備、過濾除菌設(shè)備均應(yīng)進行驗證,確保滅菌和除菌效果;前者應(yīng)在投產(chǎn)前及其后的每6個月進行驗證,后者應(yīng)在每次除菌前、后進行驗證工作(至少應(yīng)在除菌后進行一次)。
另外,應(yīng)將有毒區(qū)與無毒區(qū)嚴(yán)格分開,并有各自獨立的空氣凈化系統(tǒng)及孵室,有毒區(qū)對無毒區(qū)應(yīng)保持相對負壓,防止病毒對培養(yǎng)細胞(尤其是細胞庫)的污染。
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