聚苯乙烯ELISA板因?yàn)樵系牟煌椭谱鞴に嚨牟顒e，各產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大。溶血標(biāo)本，紅細(xì)胞溶解破裂，開(kāi)釋出血紅素形成，而血紅素中的鐵卟啉是過(guò)氧化物酶的類(lèi)似物，以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。因此，在選擇ELISA試劑盒同時(shí)要對(duì)其使用的微孔板型號(hào)進(jìn)行認(rèn)證，評(píng)估。試劑盒特異性因素固相載體的選擇，ELISA中常用的固相載體有微量滴定板、小珠和小試管三種，以微量滴定板zui為常見(jiàn)。外源性干擾物，經(jīng)常因樣品采集、貯存、處理不當(dāng)造成如樣品溶血，被細(xì)菌污染，標(biāo)本凝集不全等。如在冰箱中保留過(guò)久，其中的IgG可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。但因?yàn)槭芊椒▽W(xué)及技術(shù)前提的限制，在酶聯(lián)吸附測(cè)定中有時(shí)不可避免的會(huì)泛起一定的非特異性，但我們可以通過(guò)以上措施把非特異性顯色降至zui低限底，從而進(jìn)步檢測(cè)的特異性，并得到更正確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
綜上所述，因?yàn)槊嘎?lián)免疫吸附技術(shù)目前在技術(shù)上缺乏尺度化，盡管目前上以及我國(guó)有了部門(mén)尺度血清或參比血清。因此，血標(biāo)本在采集處理時(shí)應(yīng)小心，在冰箱中保留不易過(guò)久。在酶聯(lián)免疫測(cè)定尤其是間接ELISA中，試劑的特異性取決于使用抗原的純度。標(biāo)本凝集不全時(shí)，血清中會(huì)殘留部門(mén)纖維蛋白原，也易造成假陽(yáng)性。檢修標(biāo)本中含有酶標(biāo)記物的干擾物，內(nèi)源性干擾物類(lèi)風(fēng)濕因子、黃疸等，類(lèi)風(fēng)濕因子是可作用于多種動(dòng)物以及人IgGFc段的自身抗體，多數(shù)為IgM類(lèi)，能充當(dāng)抗原成分與固相及酶標(biāo)抗體反應(yīng)，從而呈現(xiàn)非特異性顯色。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，有海內(nèi)報(bào)道酶免HBsAg試劑檢測(cè)溶血標(biāo)本時(shí)可造成假陽(yáng)性。影響ELISA中非特異性顯色的原因良多。黃疸血標(biāo)本中常含有內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，如用辣根過(guò)氧化物酶為標(biāo)記物，就有可能產(chǎn)生非特異性顯色。
目前因?yàn)榧夹g(shù)前提的限制，包被用抗原或抗體的純度不可能達(dá)到100%，所以有些非特異性顯色不可避免，只能盡可能進(jìn)步純度，進(jìn)步特異性。它具有良好的吸附機(jī)能，孔底透明度高，空缺值低，各板之間、統(tǒng)一板各孔之間機(jī)能相近。但同其它免疫診斷方法一樣酶免試劑在它的研究、出產(chǎn)及使用中經(jīng)常會(huì)遇到非特異性題目，本文就在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)生的一些原因及如何采取一些措施，消除非特異性顯色作一分析。本文就這一原因作一扼要分析，以便可以通過(guò)以上措施把非特異顯色降至zui低限度，從而進(jìn)步檢測(cè)的特異性，并得到更正確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
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