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ELISA試劑盒使測(cè)讀結(jié)果更穩(wěn)定

閱讀：160發(fā)布時(shí)間：2015-1-23

    本實(shí)驗(yàn)zui終需要酶催化底物顯色反應(yīng)來(lái)完成，在*時(shí)間終止反應(yīng)是ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)成功的重要因素。在HRP-TMB酶反應(yīng)系統(tǒng)中，當(dāng)zui高濃度標(biāo)準(zhǔn)品顏色不再變深，倒數(shù)2-3個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品顏色開始有淺藍(lán)色時(shí)，便需要終止反應(yīng)?！耙部梢愿鶕?jù)zui高濃度標(biāo)準(zhǔn)品孔在620nm的OD值來(lái)決定，OD620=0.9-0.95之間時(shí)即可終止"。
ELISA試劑盒酶標(biāo)儀讀數(shù)的時(shí)候必須選用雙波長(zhǎng)是有什么原因呢？
因?yàn)椋?br> 1. 在使用酶標(biāo)儀之前務(wù)必預(yù)熱10-15min，
 2. ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)采用雙波長(zhǎng)測(cè)定吸光度，可以排除單波長(zhǎng)檢測(cè)時(shí)的測(cè)定干擾。
    一般采用zui大波長(zhǎng)作為參照波長(zhǎng)，在參照波長(zhǎng)下，檢測(cè)物的吸光值z(mì)ui小，檢測(cè)波長(zhǎng)和參照波長(zhǎng)的吸光值之差可以消除非特異性吸收；ELISA試劑盒因此，雙波長(zhǎng)測(cè)定，可zui大限度的消除指紋、ELISA試劑盒雜質(zhì)及不透光的物質(zhì)對(duì)酶標(biāo)儀讀數(shù)帶來(lái)的誤差，以保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確度。
   


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