我們必須對影響ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果各因素有一定的認(rèn)識(shí)。的 試劑 ，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA試劑盒檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。如不注意，就易出現(xiàn)白板、花板、色弱和假陽性等現(xiàn)象。尤其是花板現(xiàn)象(就是空白、陰性、陽性對照以及室內(nèi)質(zhì)控孔結(jié)果正常，而標(biāo)本孔的OD值卻明顯偏高)是各個(gè)廠家洗板機(jī)調(diào)試中經(jīng)常遇到的問題?，F(xiàn)將ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中注意事項(xiàng)總結(jié)如下，以期給大家?guī)硪恍﹩l(fā)，以改善洗板機(jī)的安裝調(diào)試水平，提高臨床檢測質(zhì)量。
ELISA試劑盒診斷試劑經(jīng)歷了從合成肽向基因工程抗原的過渡。由于歷史的原因，人們往往以反應(yīng)本底的好壞來衡量ELISA試劑盒，因此有些廠家為了保持較好的本底采用了單片段基因工程抗原及合成肽包被，該類試劑盒的流行病學(xué)敏感度不夠，穩(wěn)定性也成問題。也有廠家堅(jiān)持試劑盒高的流行病學(xué)敏感度，科學(xué)地對待反應(yīng)結(jié)果?；蚬こ炭乖^合成肽抗原有*的*性，就HCV-ELISA 試劑盒來講，*代產(chǎn)品為合成肽抗原，主要是HCV特異性抗原決定簇的肽片段;第二代產(chǎn)品包被的抗原既有基因工程抗原又有合成肽，只是當(dāng)時(shí)的基因工程抗原不全，僅包括了HCV 的核心區(qū)片段;第三代產(chǎn)品基本上采用了基因工程抗原，而且這些抗原包括更多、更穩(wěn)定、純度更高的HCV 特異性抗原。第三代 試劑 的敏感度大大提高了?；蚬こ炭乖c合成肽抗原的區(qū)別如下：
ELISA試劑盒基因工程抗原是抗原基因在質(zhì)粒載體中原核或真核表達(dá)的蛋白質(zhì)抗原，多以大腸桿菌或酵母菌為表達(dá)系統(tǒng)。該類抗原與合成肽相比具有以下特點(diǎn)：
a.分子量大。合成肽采用化學(xué)方法制備，由于工藝的局限，合成數(shù)量有限，只能達(dá)到數(shù)百個(gè)氨基酸;而利用基因工程制備的抗原，分子量更大。
b.穩(wěn)定性好。包被的抗原的穩(wěn)定性可使ELISA試劑盒的效期得到保證，早期以合成肽為包被抗原的 試劑 盒效期只有3-4 個(gè)月，采用基因工程抗原后效期大大延長了。
c.基因工程抗原將特異性抗原決定簇基因融合表達(dá)，表達(dá)產(chǎn)物包含更多的抗原決定簇，可提高 試劑 盒的靈敏度，提高檢出率。
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