實驗方法
注：無血清培養(yǎng)基中不含任何動物成分，為得到更佳培養(yǎng)效果可添加 10%自體血漿或2-8% 經(jīng)篩選的胎牛血清。*培養(yǎng)基中含 2-20%胎牛血清（血清具體含量由所培養(yǎng)的目的細(xì)胞而定）。由于每種細(xì)胞的貼壁時間存在差異可將所得細(xì)胞分開已達(dá)簡單的純化目的，此法成?本相對較低。如需獲得高純度目的細(xì)胞則需在使用分離液后選用免疫磁珠陽性或陰性分選。
兔腫瘤組織巨噬細(xì)胞分離液【注意事項】全過程樣本、試劑及實驗環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。為獲得的實驗結(jié)果，zui 好在取樣 2h 內(nèi)進(jìn)行實驗，樣品存放時間越長，細(xì)胞分離效果越差。樣品放置超過 6h 后 分離效果更差甚至不能達(dá)到分離目的。?本實驗不要使用高聚合材質(zhì)（如聚苯乙烯）的塑料制品，應(yīng)使用無靜電、低靜電離 心管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品，因為靜電作用將導(dǎo)致細(xì)胞貼壁、堿處理的玻璃表面 會變成毛面，影響細(xì)胞分離效果。吸取過多的乳白色細(xì)胞層及分離液層會導(dǎo)致分離液交界處的粒細(xì)胞被吸出從而使混雜粒細(xì)胞數(shù)量增加。分離液用量大于組織單細(xì)胞懸液樣本時，分離效果更佳。?如實驗后細(xì)胞得率或活性過低，請以尋求幫助，具體詳 見下方生產(chǎn)企業(yè)信息。?
兔腫瘤組織巨噬細(xì)胞分離液【儲存條件及有效期】18-25℃保存，有效期 2 年。本品易感染細(xì)菌，需無菌條件操作。無菌條件下操作，啟封后置常溫保存。如 4℃保存，本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果。
【參考值（參考范圍）】本實驗巨噬細(xì)胞提取率大于 80%。表為成年人外周血中各種細(xì)胞的數(shù)量及比例，用戶可適當(dāng)進(jìn)行參考。
【相關(guān)實驗技術(shù)方案】組織單細(xì)胞懸液制備技術(shù)。?所獲得巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù)。所獲得巨噬細(xì)胞的核酸提取技術(shù)所獲得巨噬細(xì)胞的鑒定方法 A.流式細(xì)胞技術(shù) B.免疫組化技術(shù) C.原位雜交技注：上述技術(shù)方案詳情請登陸本公司：搜索“細(xì)胞分離、純化、擴(kuò)增、鑒定及生物治療技術(shù)手冊”，并在說明書項目欄下下載使用。
兔腫瘤組織巨噬細(xì)胞分離液【可能存在的問題及解決方法】由于血液粘度、細(xì)胞密度等差異可能造成的問題及解決方案如下表所示：本分離液分離細(xì)胞的原理為密度梯度離心，其密度與溫度、大氣壓等密切相關(guān)。不同地 區(qū)客戶可根據(jù)當(dāng)?shù)厍闆r對離心條件進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。建議對離心條件進(jìn)行調(diào)整時，恒定離 心時間，對離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行調(diào)整。本分離液依照標(biāo)準(zhǔn)，全部使用藥用級原料，性能指標(biāo)與國產(chǎn)同類產(chǎn)品略有不同，可 能出現(xiàn)紅細(xì)胞沉降不*的情況，可以適當(dāng)加大離心轉(zhuǎn)速。注：在對離心條件進(jìn)行調(diào)整時，離心轉(zhuǎn)速的加減以 50-100g 為基數(shù)，直至達(dá)到分離效果，離心力zui小不得于 400g，zui大不得大于 1200g。離心時間以 20-30min 為準(zhǔn)
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