血栓素(TXB2)ELISA試劑盒測(cè)定中，應(yīng)對(duì)包被抗原或抗體的濃度和酶標(biāo)抗原或抗體的濃度予以選擇，以達(dá)到zui合適的測(cè)定條件和節(jié)省測(cè)定費(fèi)用。
1．酶標(biāo)抗抗體工作濃度的選擇
（1）用100ng/ml人IgG進(jìn)行包被，洗滌。
（2）將酶標(biāo)抗人IgG用稀釋液作一系列稀釋后分別加入已包被的孔中，保溫、洗滌。
（3）加底物顯色。加酸終止反應(yīng)后，讀取吸光度（A），繪制曲線如圖15-10。讀取A值在1.0時(shí)的酶標(biāo)抗稀釋度，作為酶標(biāo)抗體的工作濃度。該酶標(biāo)抗人IgG的工作濃度應(yīng)為1/1600。
血栓素(TXB2)ELISA試劑盒常用酶辣根過(guò)氧化酶（HRP）】
1. HRP在蔬菜作物辣根中含量很高。
2. 是一種糖蛋白，含糖量約18％；分子量為44kD。
3. 是一種復(fù)合酶，由主酶（酶蛋白）和輔基（亞鐵血紅素）結(jié)合而成的一種卟啉蛋白質(zhì)。
4. 主酶為無(wú)色糖蛋白，在275nm波長(zhǎng)處有zui高吸收峰；輔基是深棕色的含鐵卟啉環(huán)，在403nm波長(zhǎng)處有zui高吸收峰。
血栓素(TXB2)ELISA試劑盒用于稀釋高濃度的結(jié)合物以配成工作液。為避免結(jié)合物在反應(yīng)中直接吸附在固相載體上，在稀釋緩沖液中常加入高濃度的無(wú)關(guān)蛋白質(zhì)（例如1%牛血清白蛋白），通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)以抑制結(jié)合物的吸附。一般還加入具有抑制蛋白質(zhì)吸附于塑料表面的非離子型表面活性劑，如吐溫20，0.05%的濃度較為適宜。在間接測(cè)定抗體時(shí)，血清標(biāo)本需稀釋后進(jìn)行測(cè)定，也可應(yīng)用這種稀釋液。
血栓素(TXB2)ELISA試劑盒使用目的：
本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中S100鈣粒蛋白A（S100A8）含量。
血栓素(TXB2)ELISA試劑盒標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
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