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技術(shù)文章

ELISA試劑盒的運用規(guī)范

閱讀:253發(fā)布時間:2017-5-16

咱們知道,在ELISA中通常有兩次抗原抗體反響,即加標(biāo)本和加酶物后。ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的只在固相表面上發(fā)作。以抗體包被的夾心法為例,參加板孔中的標(biāo)本,其間的抗原并不是都有均等的和固相抗的機會,只有zui靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體觸摸。    

上海紀(jì)寧技術(shù)員提到:這是一個逐漸平衡的進程,因而需經(jīng)分散才能達到反響的終點。在這以后參加的酶符號抗體與固相抗原的也相同如此。這就是為何ELISA反響總是需求必定時刻的溫育。    
溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫文4℃(冰箱溫度)等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體的適宜溫度。在樹立ELISA辦法作反響動力學(xué)研討時,實驗標(biāo)明,兩次抗原抗體反響通常在37℃經(jīng)1-2小時,產(chǎn)品的生成可達高峰。

   
為加快反響,可進步反響的溫度,有些實驗在43℃進行,但不宜選用更高的溫度??乖贵w反響4℃更為*,在放射免疫測定中多使反響在冰箱中放置一晚,以形成zui多的沉積。但因所需時刻太長,在ELISA中通常不予選用。

   
若用保溫箱,ELISA板應(yīng)放在濕盒內(nèi),濕盒要選用傳熱性杰出的資料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,zui終將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)則的溫度,特別是在氣溫較低的時分更應(yīng)如此。無論是水浴仍是濕盒溫育,反響板均不宜疊放,以保證各板的溫度都能敏捷平衡。


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