培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)是非常復(fù)雜的一個(gè)過(guò)程，江蘇綠葉將教您一些操作技巧，希望能給各位老師在實(shí)驗(yàn)中帶來(lái)方便。

*、添加劑的添加

　　1.溫度的掌握：卵黃和抗生素類(lèi)添加的溫度都不應(yīng)太高。

2.定量：過(guò)多會(huì)抑制一些目標(biāo)菌，太少又導(dǎo)致雜菌的過(guò)度生長(zhǎng)。

第二、培養(yǎng)溫度的掌握：

　　1.真菌類(lèi)：25-28℃培養(yǎng)

　　2.細(xì)菌類(lèi)：李氏菌在增菌和生化中要求培養(yǎng)溫度在30℃左右。

　　3.其他一般在36℃左右

第三、接種方法：常用的方法主要有劃線(xiàn)、三點(diǎn)接種、穿刺接種、傾注接種、涂布接種、液體接種。

第四、革蘭氏染色方法：染色時(shí)間的掌握、沖洗的方法。

第五、劃線(xiàn)獲得單個(gè)菌落的方法。劃不出單個(gè)菌落的原因：

　　1.平板上有過(guò)多的水分;

　　2.劃線(xiàn)時(shí)接種環(huán)未經(jīng)反復(fù)灼燒。

　　3.多區(qū)劃線(xiàn)，三區(qū)或四區(qū)劃線(xiàn)。

第六、涂布和傾注的區(qū)別：

　　1.涂布利于觀察，但由于涂布棒上會(huì)帶有少量的菌液，影響計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。

2.涂布更為準(zhǔn)確，但不利于觀察菌落的狀態(tài)。

第七、培養(yǎng)基配制時(shí)應(yīng)注意的問(wèn)題：

　　1.滅菌溫度要嚴(yán)格控制，按照要求滅菌，尤其含糖量較高的培養(yǎng)基溫度不應(yīng)太高，過(guò)高會(huì)導(dǎo)致糖分焦化，影響質(zhì)量。

　　2.瓊脂培養(yǎng)基不能反復(fù)溶化。反復(fù)溶化會(huì)破壞培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分。

　　3.培養(yǎng)基不能反復(fù)滅菌，反復(fù)滅菌也會(huì)導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)成分的破壞。

4.含瓊脂的培養(yǎng)基滅菌后，要搖勻。