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ELISA試劑盒的是非特異性

閱讀：279發(fā)布時間：2016-7-8

    因此含雜質較多的抗原也可采用捕獲包被法,試驗的特異性、敏感性均由此得以改善，重復性亦佳。蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結合的，靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用于。ELISA試劑盒可將聚苯乙烯板先經紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時），以增加其吸附性能。例如，在檢測抗DNA抗體時，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結合。換言之，包被即是抗原或抗體結合到固相載體表面的過程。

    當抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對該抗原的特異抗體作預包被，其后通過抗原抗體反應使抗原固相化。ELISA試劑盒也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴大應用于各種抗原物質的定量測定。
    IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附力，其聯(lián)結多發(fā)生在Fc段上，抗體結合點暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。間接包被的另一優(yōu)點是抗原用量少，ELISA試劑盒僅為直接包被的1/10乃至于/100，這種物理吸附，受蛋白質的分子量、等電點、濃度等的影響，抗心磷脂抗體的ELISA試劑盒一般采用這種包被方式。固相載體先用堿性蛋白質，如聚賴氨酸、*等作預包被，也可提高核酸的結合力。

 


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