ELISA試劑盒使用指南------ 步驟、常見(jiàn)問(wèn)題、解決方案、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
1、 加樣器不確；尤其10ul以下的加樣器，對(duì)結(jié)果影響極大；
2、 保溫設(shè)備不良；
3 、洗滌用水不規(guī)范。 (1) 校正加樣器；10ul以下加樣器采用進(jìn)口產(chǎn)品（芬蘭、法國(guó)等）； (2) 仔細(xì)校正溫度到37℃，水浴箱為佳； (3) 必須使用去離子水或蒸餾水，不得用自來(lái)水、礦泉水等。
4、 認(rèn)真閱讀使用說(shuō)明書(shū)。 樣品加樣 (1) 加樣不準(zhǔn)確； (2) 沒(méi)有混勻。 加樣時(shí)一定要仔細(xì)。加樣后，再檢查，以防漏加、錯(cuò)加。加樣后，反復(fù)抽吸3次混勻，防止血清聚集孔底，導(dǎo)致非特異性吸附。洗滌 洗滌不* ,每次注水洗滌，應(yīng)靜止30秒鐘；選用吸水紙作為襯墊，每次洗滌后扣干孔內(nèi)水分；可選用塑料洗滌瓶。 加酶反應(yīng) 漏加 滴加后，認(rèn)真檢查各孔。
5、結(jié)果判斷 (1) 包括陰性對(duì)照孔在內(nèi)，各孔顯色普遍偏深； (2) 包括陽(yáng)性對(duì)照在內(nèi)，各孔均無(wú)顯色； (3) 陽(yáng)性對(duì)照不顯色，而其它樣本顯色正常； (4) 有些標(biāo)本顯色不深，判斷陽(yáng)性困難?？赡苁窍礈觳怀浞郑患訕舆^(guò)量；溫育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)溫度過(guò)高；按說(shuō)明書(shū)重新操作。如無(wú)改善， 可與生產(chǎn)廠家； 如果是漏加樣本或酶液；溫育時(shí)間過(guò)短溫度過(guò)低；試劑保存不當(dāng)活性下降；按說(shuō)明書(shū)重新 操作。如無(wú)改善，可與生產(chǎn)廠家； 陽(yáng)性對(duì)照漏加、錯(cuò)加或失效。重新操作。如無(wú)改善，可與廠家，索要對(duì)照品； 重新操作。使用酶標(biāo)儀，測(cè)定光吸收度，按P/N值標(biāo)準(zhǔn)判斷。
6、ELISA試劑盒保存 保存不規(guī)范 一定要在2-8℃存放。不得過(guò)高，也不得凍存（凍存后，酶液將失效）。 對(duì)照品 對(duì)照品為凍干品 按對(duì)照管標(biāo)示，加入相應(yīng)體積的去離子水或蒸餾水復(fù)溶，充分溶解混勻?？砂凑f(shuō)明書(shū)使用。
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