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閱讀:577發(fā)布時間:2014-8-21
單細(xì)胞基因表達(dá)的大規(guī)模分析,有可能發(fā)現(xiàn)罕見的細(xì)胞群和血統(tǒng)關(guān)系,但是需要有效的方法進(jìn)行細(xì)胞捕獲和mRNA測序。盡管細(xì)胞條形碼策略允許超低深度的單細(xì)胞平行測序,但是測序深度較淺的限制還沒有得到直接的研究。
研究小組使用的技術(shù),主要集中在一個“微流體”設(shè)備,在這個設(shè)備中單個細(xì)胞被捕獲并流入納米級的小室中,那里它們有效而地進(jìn)行DNA測序所必需的化學(xué)反應(yīng)。研究表明,確定和拼出*序列,并成功地確定細(xì)胞類型所需要的閱讀步驟數(shù)量,比原先估計的少100倍。這項技術(shù),是由Fluidigm公司開發(fā),可同時用于96個細(xì)胞的單獨(dú)過程。
Kriegstein稱,識別不同細(xì)胞類型的數(shù)百個新型生物標(biāo)志物,將提高科學(xué)家們對于出現(xiàn)特化神經(jīng)元亞型的理解。zui終,這種集中于單細(xì)胞基因活性的新方法,與其他單細(xì)胞技術(shù)(包括顯微成像)相結(jié)合,可能會揭示腦部發(fā)育障礙的起源。
Kriegstein指出,這個過程可以揭示一些腦部疾病,包括平腦癥,這種疾病患者大腦皮層中的褶皺無法發(fā)育,而且疾病在發(fā)育后期才被診斷,如自閉癥和精神分裂癥。
根據(jù)這篇論文的作者介紹,這種分析單細(xì)胞中分子的策略,不僅有利于研究特化細(xì)胞如何出現(xiàn)在發(fā)育有機(jī)體的特定時間和地點(diǎn),也有利于監(jiān)測干細(xì)胞(設(shè)計用于組織置換)的細(xì)胞特性,以及調(diào)查腫瘤內(nèi)細(xì)胞多樣性以確定癌細(xì)胞存活和傳播的原因。
任何未經(jīng)處理的生物樣品,無論多么純,其中都含有各種各樣代表不同組織類型的細(xì)胞。研究人員已經(jīng)測定了這些樣品中的結(jié)合遺傳物質(zhì)。為了研究哪些基因是活躍的,哪些是休眠的,他們使用測序步驟的無理性重復(fù),來捕捉足夠數(shù)量的信使RNA序列,這些序列轉(zhuǎn)錄自交換基因。然而,很難從混合組織樣品中推斷,哪些基因是由特定的細(xì)胞類型表達(dá)的。
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