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技術(shù)文章

ELISA試劑盒的五大代測(cè)方法

閱讀：229發(fā)布時(shí)間：2017-3-20

ELISA試劑盒試驗(yàn)中常會(huì)遇到這些疑問(wèn)：    
1. 溫育條件紛歧致，上海恒遠(yuǎn)建議：恒溫箱溫育較水浴顯色深，OD值高出0.1-0.15，均選用恒溫箱。如用水浴水溫應(yīng)控制在37℃。    
2. 樣品數(shù)量紛歧，加樣時(shí)刻長(zhǎng)短紛歧。當(dāng)重復(fù)某相同品時(shí)，加樣時(shí)刻盡可能與接近。    
考慮到有些客戶(hù)沒(méi)有試驗(yàn)設(shè)備，我公司還能夠供給代測(cè)效勞，只需付試劑盒的費(fèi)用，代測(cè)是免費(fèi)的哦！
間接法 ：此測(cè)定方法與直接法類(lèi)似，紛歧樣在于一級(jí)抗體沒(méi)有酶符號(hào)，改用酶符號(hào)的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原量。    
雙抗體夾心法 ：被檢查的抗原包被在兩個(gè)抗體之間，其間一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上，即捕捉抗體。
ELISA試劑盒另一個(gè)則是檢查抗體，此抗體可用酶符號(hào)后直接測(cè)定抗原的量；或不符號(hào)，再透過(guò)酶符號(hào)的二級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原的量。
這兩種抗體有必要當(dāng)心挑選，才可防止交互反應(yīng)或競(jìng)賽相同的抗原聯(lián)絡(luò)部位。        
競(jìng)賽法：樣本里的抗原（安閑抗原）和純化并固定在固相載體上的抗原（固定抗原）一同競(jìng)賽相同的抗體，當(dāng)樣品里的安閑抗原越多，就能夠聯(lián)絡(luò)越多的抗體，而固定抗原就只能聯(lián)絡(luò)到較少的抗體，反之亦然。
經(jīng)清洗進(jìn)程，洗去安閑抗原和抗體的復(fù)合物，只留下固定抗原和抗體的復(fù)合物，拿來(lái)與只需固定抗原的對(duì)照組效果相比較，根據(jù)呈色差異就可計(jì)算出樣品里的抗原含量。
ELISA試劑盒直接法 ：將抗原直接固定在固相載體上，參加酶符號(hào)的一級(jí)抗體，即可測(cè)定抗原總量，此一級(jí)抗體的特異性非常重要。


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