表達(dá)SV40T和EBNA1的人胚腎細(xì)胞,293ET細(xì)胞
細(xì)胞傳代的一般方法
開(kāi)始表達(dá)SV40T和EBNA1的人胚腎細(xì)胞,293ET細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、*溶液(1萬(wàn)單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%*、PBS洗液。
用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20 ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)
C02孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、—20℃冰箱
操作步驟:鏡檢,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,*溶液0.3m1,7.5%*溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%*溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液*覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞*脫落到*中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。
其它供應(yīng)新產(chǎn)品:
大鼠葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(GLUT4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
大鼠*(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
人血管性血友病因子裂解蛋白酶(vWFcp)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
豬催乳素(PRL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4(OCT4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
牛白介素4(IL4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠乳過(guò)氧化物酶(LPO)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶1(γGT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
兔基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠肝素結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子(HBEGF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
豬骨保護(hù)素(OPG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠鞘磷脂(SPH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠纖維蛋白原β(FGβ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠胰高血糖素(GC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠鐵調(diào)素(Hepc)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
狗白介素13(IL13)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
大鼠*羥化酶(TH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠*羥化酶(TH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠載脂蛋白B(APOB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
人轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
大鼠α2-HS糖蛋白(αHSG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
大鼠抑制素βC(INHβC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
猴半乳糖凝集素3(GAL3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
人半乳糖凝集素3(GAL3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β誘導(dǎo)蛋白(TGFβI)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β誘導(dǎo)蛋白(TGFβI)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
猴凝溶膠蛋白(GS)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
人Ki-67蛋白(Ki67P)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
豬細(xì)胞間粘附分子1(ICAM1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
狗胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
人頭蛋白(NOG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠載脂蛋白C1(APOC1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
狗10kDa干擾素γ誘導(dǎo)蛋白(IP10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
人嗅素4(OLFM4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠纖維介素蛋白(FGL2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
*(SCT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
大鼠末端補(bǔ)體復(fù)合體C5b-9(C5b-9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
人IgG-Fc片段低親和力受體Ⅲb(FcγR3B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
人硬骨素(SOST)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
人補(bǔ)體因子I(CFI)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
豬β-乳球蛋白(βLg)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
人心肌型蘭尼定受體2(RYR2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
馬血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A(VEGFA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
牛谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)