小鼠過(guò)敏毒素/補(bǔ)體片斷4a（C4a）ELISA試劑盒其他指標(biāo)：HCC 94 [HCC941122]（子宮鱗癌（高分化））  可溶性間粘附分子1（sICAM-1） 解整合素樣金屬蛋白酶8（ADAM8）
A-431（表皮癌）  間粘附分子2（ICAM-2/CD102） 髓過(guò)氧化物酶（MPO）
HeLa 229（宮頸癌）  間粘附分子3（ICAM-3/CD50） 顆粒酶B（Gzms-B）
CBRH-7919（肝癌）  結(jié)締組織生長(zhǎng)因子（CTGF） 顆粒酶A（Gzms-A）
RH-35（肝癌）  白介素18（IL-18） 牛小腸堿性磷酸酶（CIAP）
SHZ-88（乳腺癌）  粘膜相關(guān)上皮趨化因子（MEC/CCL28） 超氧化物歧化酶（SOD）
MLTC-1（睪丸間質(zhì)瘤）  粘膜相關(guān)上皮趨化因子（MEC/CCL28） 二肽基肽酶Ⅳ（DPPⅣ）
L6565（小鼠L6565白血病克隆系）  B活化因子受體（BAFF-R） 組織蛋白去乙?；福℉D）
F9（畸胎瘤）  血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3（VEGFR-3/Flt-4） 甲基化酶（Methylase）
LLC Lewis（肺癌）  血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1（VEGFR-1/Flt1） 抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP-5b） 

小鼠過(guò)敏毒素/補(bǔ)體片斷4a（C4a）ELISA試劑盒 ELISA的應(yīng)用

　　　ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù)，現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲(chóng)病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定，根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果，認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查，而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚*千份標(biāo)本,因此，也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來(lái)測(cè)定抗體，而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大，

　　　可概括四個(gè)方面：

　　　1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。

　　　2、研究抗酶抗體的合成。

　　　3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。

　　　4、定量檢測(cè)體液中抗原或抗體成份。

試劑器材

試劑

　　?。?font face="Times New Roman">1）　包被緩沖液（PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液）:

　　　Na2CO3 1.59克

　　　NaHCO3　 2.93克

　　　加蒸餾水至1000ml

　　?。?font face="Times New Roman">2）　洗滌緩沖液（PH7.4PBS）：0.15M

　　　KH2PO4 　0.2克

　　　Na2HPO4·12H2O　2.9克

　　　NaCl　8.0克

　　　KCl　0.2克

　　　Tween-20　0.05%　0.5ml

　　　加蒸餾水至1000ml

　　?。?font face="Times New Roman">3）　稀釋液：

　　　牛血清白蛋白（BSA） 0.1克

　　　加洗滌緩沖液至100ml

　　　或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5～10%使用。

　　?。?font face="Times New Roman">4）　終止液（2M　H2SO4）：

　　　蒸餾水178.3ml，逐滴加入濃硫酸（98%）21.7ml。

　　?。?font face="Times New Roman">5）　底物緩沖液（PH5.0磷酸棗檸檬酸）:

　　　0.2MNa2HPO4（28.4克/L）25.7ml

　　　0.1M檸檬酸（19.2克/L）　 24.3ml

　　　加蒸餾水50ml。

　　?。?font face="Times New Roman">6）　TMB（四甲基聯(lián)苯胺）使用液:

　　　TMB（10mg/5ml無(wú)水乙醇）0.5ml

　　　底物緩沖液（PH5.5）　 10ml

　　　0.75%H2O2　 　32μl

　　?。?font face="Times New Roman">7）　ABTS使用液:

　　　ABTS　0.5mg

　　　底物緩沖液（PH5.5）　 1ml

　　　3%H2O2　 　2μl

　　　（8）　抗原、抗體和酶標(biāo)記抗體。

　　　（9）　正常人血清和陽(yáng)性對(duì)照血清。

elisa試劑盒樣品收集，處理及保存方法

　　　1、 血清：操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。

　　　2、 血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

　　　3、 細(xì)胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

　　　4、 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。

　　　5、 保存：如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。小鼠過(guò)敏毒素/補(bǔ)體片斷4a（C4a）ELISA試劑盒