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一管式病毒DNAout
產(chǎn)品及特點(diǎn) 本產(chǎn)品是專門用于從血清(血漿)等液體樣品中提取病毒(如HBV)DNA的產(chǎn)品,其原理是異硫氰酸胍/LiCl溶液即能裂解病毒,又能沉淀DNA。本產(chǎn)品靈敏度高,穩(wěn)定性好,使用簡(jiǎn)單快捷,尤其適合于整合到臨床PCR檢測(cè)試劑盒中。
1. 回收率高,可以達(dá)到90%以上,高于絕大部分基于離心柱的提取方法。
2. 靈敏度高,通過PCR檢測(cè)到的zui終靈敏度可以達(dá)到30-50拷貝/mL。
3. 一管式操作,不使用離心柱,整個(gè)操作過程均在室溫下完成。
4. 安全無毒,不需要使用*和氯仿等有機(jī)溶液。
5. 處理量大,如果加上病毒離心富集步驟,zui多可以處理1.5 mL液體病毒樣品。
6. 與PCR和熒光PCR兼容。
規(guī)格及成分 成 份 50 次包裝 200 次包裝
病毒DNAOUT 30 mL 120 mL
使用手冊(cè) 1份 1份
運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸及保存,有效期一年。
自備試劑 異丙醇,70%乙醇
使用方法 1. 在1.5 mL螺旋蓋塑料離心管(不要使用壓蓋式塑料離心管)中加入0.1-0.2 mL液體樣品。如果病毒需要富集,可以將1.5 mL液體在4℃ 24,000 g冷凍離心60分鐘, 移棄1.3 mL后繼續(xù)操作。
2. 加入0.6 mL病毒DNAOUT溶液,振蕩30秒混勻后室溫放置10分鐘。
3. 振蕩30秒混勻后加入0.7 mL異丙醇,振蕩30秒混勻后,15,000 g室溫離心15分鐘。
4. 移棄上清,注意不要觸及管底的DNA沉淀,加入1.0 mL 70% 乙醇,振蕩數(shù)秒后 15,000 g室溫離心5分鐘。
5. 移棄上清,注意不要觸及管底的DNA沉淀。再短暫離心數(shù)秒, 移棄殘留上清(殘留的乙醇會(huì)影響后續(xù)反應(yīng))。此時(shí)離心面的管壁上將有可見的膜狀沉淀,加入200 μl 超純水,用移液槍仔細(xì)吹打離心管管底和管壁的膜狀沉淀,使其溶解。溶解液混濁或有少量不溶物是正?,F(xiàn)象,如果溶于200 uL水而樣品使用量不超過PCR體系的1/2時(shí),不溶物一般不會(huì)影響后續(xù)PCR反應(yīng)。不要離心只取上清使用,因?yàn)椴蝗艹恋砦镏泻蠨NA,必須取混合液使用(哪怕很渾濁)。
6. 樣品可以直接取適量用于PCR,也可保存于-20℃長(zhǎng)期保存。
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