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新一代高速測序技術(shù)完成沃森基因組

時(shí)間:2013-6-5閱讀:171
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新一代高速測序技術(shù)完成沃森基因組
         在4月17日的《自然》雜志上,美國的科學(xué)家發(fā)表了*利用新一代高速測序技術(shù)得到的全基因組,而接受這一全基因組測序的不是別人,正是“DNA之父”詹姆斯•沃森。該成果標(biāo)志著人類基因組測序領(lǐng)域的又一個(gè)里程碑,新技術(shù)向個(gè)人化基因組這一偉大目標(biāo)又邁進(jìn)了一步。
 
這項(xiàng)由美國康涅狄格454 Life Sciences公司開發(fā)的新技術(shù),能夠讓更多的測序反應(yīng)在同一表面同時(shí)進(jìn)行,其zui顯著優(yōu)點(diǎn)就是大幅度降低了測序時(shí)間和花費(fèi)。2003年,“人類基因組計(jì)劃”獲得首張人類全基因組圖譜,為了測定人類基因組的30億對堿基,科學(xué)家們花費(fèi)了4.37億美元和13年的時(shí)間。此后,美國生物學(xué)家、“測序先鋒”Craig Venter領(lǐng)導(dǎo)的團(tuán)隊(duì)在改進(jìn)傳統(tǒng)技術(shù)的基礎(chǔ)上,開發(fā)出一種快速追蹤測序方法,并于2007年9月完成測定了Venter自身全基因組的測定工作。這花費(fèi)了大約1億美元。而相比之下,這次新開發(fā)的下一代測序技術(shù)總共只花了不到150萬美元,耗費(fèi)的時(shí)間只有4個(gè)月。
 
在新的技術(shù)中,研究人員避免了一個(gè)復(fù)雜而昂貴的過程——利用細(xì)菌對樣品進(jìn)行克隆,而這在zui早的測序方法中是必需的。研究人員直接通過一個(gè)稱為“聚合酶連鎖反應(yīng)”(PCR)的過程,對樣品進(jìn)行擴(kuò)增。很長的DNA鏈會(huì)被并行測序器拆分開來,這些數(shù)據(jù)再作為計(jì)算機(jī)處理的“原料”,進(jìn)行重新組裝和分析。
 
論文作者、454 Life Sciences的創(chuàng)始人、Rothberg兒童疾病研究所的Jonathan Rothberg表示,  “Venter的基因組是上一代基因測序技術(shù)的終結(jié)。我們從2007年1月開始進(jìn)行沃森的基因測序工作,5月就發(fā)布了原始數(shù)據(jù)?,F(xiàn)在,這項(xiàng)新技術(shù)還在越來越好,越來越便宜。”
 
    然而,并非人人都認(rèn)同新的方法更好。Venter說,“這是測序技術(shù)的一個(gè)新標(biāo)準(zhǔn),但我并不認(rèn)為它也是基因組覆蓋和獨(dú)立裝配的新標(biāo)準(zhǔn)。”顧慮之一就是與傳統(tǒng)方法相比,這種快速的測序方法將DNA切得太碎(每段250個(gè)堿基),相應(yīng)的,探測基因組中擁有大塊重復(fù)序列的區(qū)域就變得更加困難,因此就讓片斷重新裝配成基因組在技術(shù)上很有挑戰(zhàn)性。
 
    美國華盛頓大學(xué)的遺傳學(xué)家Evan Eichler說,他發(fā)現(xiàn)5%—10%的沃森基因組是由這種復(fù)雜的區(qū)域組成的,其中包含著個(gè)體差異很大的致病基因。“我所關(guān)注的就是新的測序技術(shù)能否帶給我們這些區(qū)域中的信息?”還有一些人指出,論文的作者很大程度上是在人類基因組計(jì)劃的參考序列指引下,才得以重新組裝出整個(gè)基因組。加州大學(xué)戴維斯分校的進(jìn)化生物學(xué)家Jonathan Eisen表示,“他們下一步的工作就是要表明在沒有參考的情況下,新技術(shù)同樣能夠把事情做好。”
 
    不過,論文作者還是堅(jiān)持認(rèn)為,新的研究成果是一個(gè)重要的里程碑,尤其在個(gè)人化基因組和個(gè)人化治療方面。因?yàn)槠平馍艽a并找到缺陷基因?qū)τ诟鞣N遺傳疾病、癌癥、肥胖等具有難以估量的意義。



 

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