培養(yǎng)基神經膠質細胞制備過程

　　神經細胞（神經元）不易培養(yǎng)，只有在適宜情況下，如接種在膠原底層上，或加入神經生長因子和膠質細胞因子時，可出現一定程度的分化，長出突起等現象，但很難使之增值。而神經膠質細胞是神經組織中比較容易培養(yǎng)的成分。

　　人、鼠等腦組織即可用于神經膠質細胞培養(yǎng)基，不僅能獲得生長的膠質細胞，也可形成能傳代的二倍體細胞系。一般說來，膠質細胞在培養(yǎng)中生長不穩(wěn)定，不易自發(fā)轉化，但對外界因素仍保持很好的敏感性，可用ROUS病毒和SV4等誘發(fā)轉化。

　　1、從手術室無菌取腦髓灰質或白質后，仔細剝除腦膜、血管和纖維成分，置Hanks液中漂洗一、二次。

　　2、置于30—50倍體積的Hanks液中，此時腦組織比較柔軟，反復吹打即制成細胞懸液。

　　3、把懸液注入離心管室溫中直立5—10分鐘后，細胞或細胞團快自然下沉，脂肪等雜物易漂浮，可吸除上層、反復二、三次，即可排除脂肪成分和其它碎塊并獲較多細胞成分。

　　4、在沉降物中加入適量培養(yǎng)液，通過紗網成紗布過濾，計數并調整細胞密度。

　　5、接入培養(yǎng)基瓶或皿中，置5%CO2溫箱中培養(yǎng)。

　　該細胞適應環(huán)境過程較長，接種后貼壁較慢。貼壁后短期內也可能不見細胞分裂現象，然而一旦生長后即能迅速進入旺盛的增殖狀態(tài)。細胞傳代可以0.25%*消化處理。