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上海哈靈生物科技有限公司
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生物試劑實(shí)驗(yàn)時(shí)常見問題
2013-10-15 閱讀(660)
生物試劑實(shí)驗(yàn)時(shí)常見問題
1 試劑空白，線性范圍變窄
現(xiàn)象：高值測不高。
原因：生產(chǎn)試劑時(shí)有效成分投料量不足;試劑成份穩(wěn)定性較差。
1.2 靈敏度變低
現(xiàn)象：酶促反應(yīng)速度曲線斜率下降，測定結(jié)果有嚴(yán)重系統(tǒng)誤差。
原因：試劑底物濃度不足。
1.3 低值偏高
現(xiàn)象：試劑空白的變化曲線（xī光度VS時(shí)間）明顯波動(dòng)。
原因：試劑自身不穩(wěn)定，自行分解；工具酶純度不夠，雜酶hán量超限，導(dǎo)致干擾作用。
2 樣品信息
樣品的溶xuè、脂xuè、黃疸等會(huì)對檢測結(jié)果產(chǎn)生非化學(xué)反應(yīng)的干擾。因此，應(yīng)該根據(jù)溶xuè、脂濁、黃疸的光譜xī收特性，采用雙波長或多波長的檢測模式，并在結(jié)果計(jì)算中扣除因溶xuè、脂xuè、黃疸引起的影響，減少干擾程度。
3 測定范圍
每種待測物都有一個(gè)可測定的濃度或活性范圍，樣品結(jié)果若超過此范圍，分析儀將顯示結(jié)果超過范圍的提示。這種現(xiàn)象表示試劑已經(jīng)變質(zhì)，應(yīng)更換合格試劑。
4 底物耗盡
使用連續(xù)監(jiān)測fǎ、兩點(diǎn)fǎ測定酶活性時(shí)，若酶活性非常高，底物接近被耗盡，xī光度上升或下降會(huì)超過某一xī光度變化范圍，監(jiān)測期的xī光度將偏離線性，使檢測結(jié)果不可靠。
5 酶的預(yù)活化
測定xuè清中的某些酶，如CK，離體（采xuè）后很容易失去活性。失活的原因是酶活性中心的活性基因巰基（一SH）被氧化造成的。只有通囘過適當(dāng)?shù)倪€原作用才能重新激活。如CK—NAC試劑盒即hán有CK活化劑，名為N一乙酰半胱氨酸。實(shí)驗(yàn)研究證明，NAC對xuè清中已失活的CK活化過程約需180 S。這就是CK測定為什么要延遲時(shí)間較長的理論依據(jù)。在AST，ALT采用IFCC推薦方fǎ測定時(shí)需要磷酸吡哆醛預(yù)活化。需要強(qiáng)調(diào)：hán有活化劑的生化試劑，其測定酶活性的結(jié)果要高些。
