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PCR 純化試劑盒/DNA 純化試劑盒

2014-12-11  閱讀(1075)

PCR 純化試劑盒/DNA 純化試劑盒
產(chǎn)品簡介:
PCR純化試劑盒(PCR Clean Up Kit),也稱DNA純化試劑盒(DNA Purification Kit)是一種用于PCR產(chǎn)物純化或從多種DNA
反應(yīng)體系中純化DNA的試劑盒。
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適用于PCR反應(yīng)后去除引物,酶,礦物油,甘油,鹽等雜質(zhì);也同樣適用于酶切,連接,磷酸化,補(bǔ)平或切平,隨機(jī)引物等反應(yīng)后的DNA純化。所得DNA可直接用于酶切,連接,轉(zhuǎn)化細(xì)菌,測序,PCR,雜交等后續(xù)操作。

本試劑盒適用于純化100bp-10kb DNA,長至30個堿基的引物均可被*去除。?
本試劑盒采用了一種新型的離子交換柱。在特定條件下,使DNA能在離心過柱的瞬間,結(jié)合到DNA純化柱上,在一定條件下又能將DNA充分洗脫,從而實現(xiàn)DNA的快速純化。無需酚氯仿抽提,無需酒精沉淀,12個樣品只需不足15分鐘即可完成。
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每個DNA純化柱可以結(jié)合的DNA量的上限約為15微克。
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DNA回收效率約為90%。接近100bp或10kb的DNA片斷回收效率要略低一些,大于10kb的DNA回收效率迅速下降。另外如果樣品中DNA含量特別低也會導(dǎo)致回收效率下降。?
每個試劑盒足夠純化50個平均體積不超過400微升的DNA樣品。
保存條件:
室溫保存,一年有效。
注意事項:?
*次使用前在溶液II
(洗滌液)中加入39ml無水乙醇,混勻,并在瓶上做好標(biāo)記。
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溶液I對人體有刺激性,操作時請小心,并注意適當(dāng)防護(hù)。
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本試劑盒所有操作均在室溫進(jìn)行,操作時無需冰浴。所有離心也均在室溫進(jìn)行。
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廢液收集管在一次抽提中需多次使用,切勿中途丟棄。
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為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明:
1.加入等體積的溶液I,混勻。
例如如DNA樣品體積為100微升,則加100微升溶液I。如果等體積混合后體積較大,可以把部分樣品加入到純化柱內(nèi),經(jīng)
離心處理后,再加入剩余的樣品繼續(xù)處理。礦物油對于本試劑盒沒有干擾。
2.加入到DNA純化柱內(nèi),
室溫放置1分鐘。
3.zui高速(16000g,約12000-14000rmp左右)離心1分鐘,倒棄收集管內(nèi)的液體。
注意:這一步一定要達(dá)到16000g,較低離心速度會導(dǎo)致回收效率下降。
4.在DNA純化柱內(nèi)加入700微升溶液II,室溫放置1分鐘。
5.zui高速離心1分鐘,洗去雜質(zhì)。倒棄收集管內(nèi)的液體。
6.再加入500微升溶液II,zui高速離心1分鐘,進(jìn)一步洗去雜質(zhì)。倒棄收集管內(nèi)的液體。
7.zui高速再離心1分鐘,除去殘留液體并讓殘留的乙醇充分揮發(fā)。
8.將DNA純化柱置于1.5毫升離心管上,加入30微升溶液III至管內(nèi)柱面上,放置1分鐘。
用1.5ml離心管作為收集管。溶液III需要直接加至管內(nèi)柱面中央,使液體被純化柱吸收。如果不慎將溶液III沾在管壁上,
一定要震動管子,使液體滑落到管底,以便被純化柱吸收。也可以用重蒸水或MiliQ級純水替代溶液III,但是水的
pH應(yīng)不小于6.5。如需得到較高濃度的DNA,可以只加20微升溶液III,但產(chǎn)量會略有下降。放置較長時間例如3-5分鐘,會對提供產(chǎn)量略有幫助。
9. zui高速離心1分鐘,所得液體即為高純度DNA



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