ELISpot技術(shù)優(yōu)勢(shì)
ELISpot技術(shù)優(yōu)勢(shì)
ELISPOT 法在檢測(cè)低頻率產(chǎn)生細(xì)胞因子的細(xì)胞時(shí)具有*的敏感性。將數(shù)目的能產(chǎn)生 IFN- 的T細(xì)胞與一百萬(wàn)個(gè)抗原呈現(xiàn)細(xì)胞（Antigen Presenting Cells，APC）混合后，使用 ELISPOT 法（上圖）、胞質(zhì)內(nèi)染法（中圖）和 ELISA 法（下圖）分別測(cè)量產(chǎn)生 IFN- 的細(xì)胞的數(shù)目。
ELISPOT 分析使單細(xì)胞分泌產(chǎn)物可視化。這些分析異常敏感，因?yàn)樗窃谥苯釉诜置诩?xì)胞的周圍進(jìn)行捕捉，而且是在表面被沖淡，或者被臨近的細(xì)胞上的受體捕獲，或降解之前。
· zui低至1：100萬(wàn)細(xì)胞精度的活體外頻率測(cè)量。這種分辨率已經(jīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)使用細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子的四聚物染色和 ELISA 法測(cè)量的精度。這種高敏感度是非常關(guān)鍵的，因?yàn)榭乖禺愋?T 細(xì)胞在體外都是典型性的低頻率。
· 高產(chǎn)量 T 細(xì)胞分析成為可行。一個(gè)經(jīng)過(guò)訓(xùn)練的相關(guān)實(shí)驗(yàn)室小組可以測(cè)試成百的樣本中幾十種抗原的反應(yīng)。
· 只需要少量細(xì)胞，就可以用于通其他細(xì)胞學(xué)分析方法進(jìn)行比較。例如，45毫升的血液就足以用于測(cè)試600種不同抗原/肽類物質(zhì)的反應(yīng)。
· 可以定義CD4和CD8細(xì)胞的免疫因子指標(biāo)。這是因?yàn)橹恍枰贁?shù)細(xì)胞，分析就可以在高產(chǎn)量模式下進(jìn)行。ELISPOT 分析在篩選肽庫(kù)，繪制免疫因子方面是一個(gè)理想的工具。
· 用于確定抗原特異性 T 細(xì)胞的功能性親和力。這zui大可能受到肽類藥物刺激至50%的影響。
· 可以用于研究未經(jīng)藥物處理過(guò)的細(xì)胞的分泌過(guò)程。如果觀察到凈產(chǎn)量減少，可以確定這種區(qū)別是來(lái)自于分泌細(xì)胞的減少，還是每個(gè)細(xì)胞分泌產(chǎn)量的減少。
· 淋巴細(xì)胞在 ELISPOT 分析后依然存活。這使得分析之后進(jìn)行增值，用于更進(jìn)一步的分析、克隆或者低溫儲(chǔ)藏成為可能。
· 低溫儲(chǔ)藏后的人類淋巴細(xì)胞可以用于檢測(cè)，而不會(huì)丟失其功能。治療前和治療后的樣本可以并排進(jìn)行測(cè)試，結(jié)果可以重復(fù)。
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