一、HSV-1動物模構(gòu)建常用動物模型選擇
小鼠模型（常用）
品系：BALB/c、C57BL/6、SKH-1無毛小鼠（便于觀察皮膚病變）。
優(yōu)點：成本低、操作方便；可模擬急性感染和潛伏感染。
局限性：小鼠對HSV-1的天然抵抗力較強，需調(diào)整病毒劑量或免疫抑制。
兔模型（如新西蘭白兔）
應(yīng)用：眼部HSV-1感染（角膜炎模型）、潛伏感染研究。
特點：眼部和三叉神經(jīng)節(jié)潛伏感染與人類更相似。
豚鼠模型
優(yōu)勢：可建立生殖器HSV-1感染模型，模擬皮膚-黏膜病變。
二、HSV-1動物模構(gòu)建病毒接種方式與疾病模型
1. 急性感染模型
接種途徑：
角膜劃痕接種：模擬皰疹性角膜炎（病毒滴度通常為1×10?~10? PFU/眼）。
鼻內(nèi)/顱內(nèi)接種：研究中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染（如腦炎）。
足墊或皮膚接種：觀察局部病變和神經(jīng)侵襲。
表型：
接種后3-7天出現(xiàn)紅腫、潰瘍（皮膚/角膜）、神經(jīng)癥狀（豎毛、癱瘓）。
2. 潛伏-再激活模型
步驟：
物理刺激（紫外線照射、角膜劃痕）。
免疫抑制（環(huán)l酰胺、地s米松）。
應(yīng)激（熱休克、束縛應(yīng)激）。
通過角膜或皮膚接種HSV-1（如KOS或McKrae株）。
急性期后（約7-14天），病毒在三叉神經(jīng)節(jié)（TG）或背根神經(jīng)節(jié)（DRG）進入潛伏狀態(tài)。
再激活誘導(dǎo)：
檢測潛伏病毒：
PCR檢測神經(jīng)節(jié)中HSV-1基因組（如LAT基因）。
體外神經(jīng)節(jié)培養(yǎng)后檢測病毒復(fù)活。
3. 免疫缺陷模型
應(yīng)用：研究宿主免疫應(yīng)答（如T細胞缺陷小鼠）。
例如：SCID小鼠或IFN-γ敲除小鼠，感染后癥狀更嚴重。
三、關(guān)鍵實驗參數(shù)
病毒株選擇：
實驗室常用株：KOS（低毒）、McKrae（高毒，易再激活）、17syn+（潛伏研究）。
病毒滴度：
小鼠角膜/皮膚：10?~10? PFU；顱內(nèi)接種：103~10? PFU（避免快速致死）。
感染監(jiān)測：
臨床癥狀評分（如眼部病變分級、皮膚損傷面積）。
病毒載量檢測：qPCR（如gB基因）或噬斑試驗（Plaque Assay）。
免疫組化：檢測病毒抗原（如HSV-1 gD）。
組織病理：神經(jīng)節(jié)炎癥、神經(jīng)元壞死。
四、注意事項
生物安全：HSV-1為BSL-2病原體，需在二級生物安全柜中操作。
對照設(shè)置：
空白對照（PBS接種）、滅活病毒對照。
動物福利：
顱內(nèi)或高劑量感染可能導(dǎo)致癱瘓/死亡，需設(shè)定人道終點。
潛伏感染驗證：
需通過抗病d藥物（如阿x洛韋）清除急性期病毒后再檢測潛伏。
五、局限性及改進方向
局限性：
小鼠模型難以w全模擬人類HSV-1的長期潛伏周期。
兔/豚鼠成本高且操作復(fù)雜。
改進方向：
人源化小鼠模型（移植人類神經(jīng)節(jié)組織）。
基因編輯動物（如HSV-1受體轉(zhuǎn)基因小鼠）。
