產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：
產(chǎn)品英文名稱：Human/Mouse BMP-2 Protein
產(chǎn)品中文名稱：重組人/小鼠骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2（BMP-2）
規(guī)格：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg
貨號(hào)：EY-01X8722
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):
表達(dá)宿主:大腸桿菌
序列:氨基酸序列來(lái)源于： 人/小鼠BMP-2 (P21274.3)的氨基酸序列(Gln283-Arg396)。
蛋白長(zhǎng)度：重組人/小鼠BMP-2由114個(gè)氨基酸組成，預(yù)測(cè)分子量為13kda。
純度:> 95 % ，使用SDS-PAGE檢測(cè)
請(qǐng)咨詢我們。
產(chǎn)品形式:凍干粉，凍干緩沖液為無(wú)菌的20mM Tris+0.05M NaCl, pH 8.0.
基因ID:12156
使用中注意事項(xiàng):開蓋使用前，請(qǐng)先離心。本產(chǎn)品為凍干粉，推薦用該產(chǎn)品配套的Reconstitution Buffer進(jìn)行動(dòng)?動(dòng)
背景
Bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) is a kind of bone growth regulator, belonging to protein transforming growth factor-β(TGF-β) superfamily. BMP-2 protein is involved in hedgehog pathway, TGF-β signaling pathway and cytokine-cytokine receptor interaction. BMP-2 and BMP-7 are osteogenic BMP, which have been proved to be effective in inducing osteoblast differentiation in many cell types. The active form of BMP-2 can be composed of dimers of two identical proteins or heterodimers of two related bone morphogenetic proteins.
本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1.操作簡(jiǎn)便、快捷?？芍苯蛹尤氲綑z測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無(wú)需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。
2. 無(wú)放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。
3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來(lái)溶解甲臜產(chǎn)物。
4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。
操作步驟：
(一)獲得目的基因
1、通過(guò)PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。
2、通過(guò)RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。
(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體
1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。
2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。
(三) 獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種
1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。
2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。
3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。
(四)誘導(dǎo)表達(dá)
1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過(guò)夜培養(yǎng)。
2、按1∶50比例稀釋過(guò)夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。
3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。
4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。
5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。
公司正在出售的產(chǎn)品：
CCR-4(C-C chemokine receptor 4 0.5mgCCR-4(C-C chemokine receptor 4) 細(xì)胞表面趨化因子受體4抗原
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F7重組小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白 Protein
CCL3 Protein Rat 重組大鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白
DUSP14重組人 DUSP14 / MKP-6 蛋白 (His & MBP 標(biāo)簽) Protein
小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat retinol binding protein 4 (RBP-4) ELISA Kit 大鼠結(jié)合蛋白4(RBP-4)檢測(cè)試劑盒
HumanC-telopeptideoftypeⅠcollagen,CTX-ⅠELISAKit 人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
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轉(zhuǎn)基因玉米T14品系試劑盒20次
Humanselenoprotein1,SEP1ELISAKit人硒蛋白1(SEP1)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
大鼠原C(PGC)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： PGC ELISA Kit
Mouse aquaporin 5 (AQP-5) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白5(AQP-5)檢測(cè)試劑盒
Mouseansforminggrowthfactorβ2,TGFβ2ELISAKit 小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforhs-CRPELISAKit大鼠超敏C反應(yīng)蛋白
細(xì)胞NEK2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitβOHB大鼠β
重組人/小鼠骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2（BMP-2）F7重組小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白 Protein
CCR-4(C-C chemokine receptor 4 0.5mgCCR-4(C-C chemokine receptor 4) 細(xì)胞表面趨化因子受體4抗原
DUSP14重組人 DUSP14 / MKP-6 蛋白 (His & MBP 標(biāo)簽) Protein
GPR56 Protein Human 重組人 GPR56 / TM7LN4 蛋白
CCL3 Protein Rat 重組大鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白
