英文簡(jiǎn)稱(chēng)：293F細(xì)胞    

產(chǎn)品名稱(chēng)：胚腎細(xì)胞-F克隆

規(guī)格：T25

形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)；懸浮生長(zhǎng)

特征特性：

培養(yǎng)條件：懸浮培養(yǎng)用特制無(wú)血清培養(yǎng)基；貼壁培養(yǎng)用MEM-EBSS + NEAA + 10%FBS

傳代方法：1:2傳代

貨號(hào)：CS-X64010
公司產(chǎn)品僅用于科研公司有大量的優(yōu)質(zhì)細(xì)胞，還提供細(xì)胞的全程后期服務(wù)，可以向?qū)I(yè)人士咨詢(xún)?cè)敿?xì)的細(xì)胞培養(yǎng)條件，凍存方法，及相關(guān)培養(yǎng)技術(shù)。

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿(mǎn)*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)范：

主要功能：
（1）血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
（2）表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1，參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
（3）與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
生理變化：
（1）主動(dòng)脈硬化。
（2）主動(dòng)脈瘤
（3）主動(dòng)脈鈣化。
基本特性：
（1）組織來(lái)源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。
（2）鑒定：肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（4）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)：>5×105 cells/1ml。
（5）肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

血管生成素2(ANGPT2)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：ANGPT2 ELISA Kit間隙連接蛋白43抗體包裝25g

血管生成素1(ANGPT1)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：ANGPT1 ELISA Kit緊密連接蛋白25抗體包裝5g

血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(PROCR)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：PROCR ELISA Kit中心體蛋白78抗體包裝1g

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR3)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：VEGFR3 ELISA Kit6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框146抗體包裝25g

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR2)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：VEGFR2 ELISA Kit6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框154抗體包裝5g

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR1)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：VEGFR1 ELISA Kit9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框16抗體包裝1g

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子D(VEGFD)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：VEGFD ELISA Kit9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框78抗體包裝5g

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGFC)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：VEGFC ELISA Kit9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框79抗體包裝25g

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子B(VEGFB)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：VEGFB ELISA Kit9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框84抗體包裝5g

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A(VEGFA)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：VEGFA ELISA Kit9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框85抗體包裝25g

血管內(nèi)皮鈣黏蛋白(CDH5)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：CDH5 ELISA Kit9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框91抗體包裝5g

血管緊張素Ⅱ(ANGⅡ)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：ANGⅡ ELISA Kit9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框93抗體包裝100g

血管緊張素Ⅰ(AngⅠ)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：AngⅠ ELISA Kit9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框96抗體包裝500g

血管非炎性蛋白3(VNN3)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：VNN3 ELISA Kit9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框98抗體包裝1g

序列相似家族3成員B(FAM3B)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：FAM3B ELISA Kit分裂周期蛋白5樣蛋白抗體包裝5g
293F細(xì)胞心鈉肽(ANP)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：ANP ELISA Kitα2巨球蛋白樣蛋白1抗體 α2ML1包裝1g

心肌營(yíng)養(yǎng)素1(CT-1)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：CT-1 ELISA Kit凋亡相關(guān)蛋白3抗體包裝5g

心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：cTn-Ⅰ ELISA Kit肌動(dòng)蛋白α/α-SMA/α Actin抗體包裝1g

心肌肌鈣蛋白(cTn-Ⅰ)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：cTn-Ⅰ ELISA KitATP結(jié)合蛋白家族7抗體包裝25g

小扁豆素結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：AFP-L3 ELISA KitASCL2蛋白抗體包裝5g

小扁豆素結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：AFP-L2 ELISA Kit磷酸化脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體包裝1g

小扁豆素結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：AFP-L1 ELISA Kit磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝100g

腺苷高半酶(AHCY)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：AHCY ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝25g

腺病毒IgG抗體(ADV IgG)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：ADV IgG ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝500g

纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：TAFI ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝25g

纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：PAI-1 ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝5g

纖溶酶原激活劑抑制物(PAI-1)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：PAI-1 ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝10MG

纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：PAP ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝1mg

纖連蛋白(FN)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：FN ELISA Kit活化轉(zhuǎn)錄因子5抗體包裝5mg

細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)檢測(cè)試劑盒英文名稱(chēng)：Cyclin-D3 ELISA Kit活化轉(zhuǎn)錄因子6β抗體包裝5mg
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡，co2孵箱。
1.2 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率指數(shù)生的細(xì)胞，以0.25％消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線。